[发明专利]通过高效液相色谱法分离测定雷贝拉唑钠及其杂质的方法

说明书

技术领域

本发明属于药物分析领域，具体涉及通过高效液相色谱法分离测定雷贝拉唑钠及其杂质的方法。 

背景技术

雷贝拉唑钠(Sodium Reheprazole)是第二代质子泵抑制剂，其通过特异性地抑制H⁺/K⁺-ATP酶系统的作用而抑制胃酸分泌。临床上适用于治疗消化性溃疡、反流性食管炎和胃泌素瘤。雷贝拉唑钠由日本卫材公司研发，于1997年在日本上市，剂型为肠溶片。目前在全世界21个国家上市，中国也有多家公司生产雷贝拉唑钠肠溶片、肠溶胶囊两种剂型。注射用雷贝拉唑钠为印度Cadila制药有限公司于2004年5月在印度首次批准上市，规格为20mg。雷贝拉唑钠现已成为质子泵抑制剂的主导产品。 

雷贝拉唑钠的化学名为：2-[[[4-(3-甲氧丙氧基)-3-甲基-2-吡啶基]甲基]亚磺酰基]-1H–苯并咪唑钠盐，分子式：C₁₈H₂₀N₃NaO₃S，结构式如下： 

雷贝拉唑钠的常见不良反应为头痛，其它少见的不良反应有无力、便秘、头晕、恶心、腹痛及尿异常，可能由其中的杂质引起。雷贝拉唑钠合成过程中的起始原料、中间体、终产物类似物及降解产物等均可能成为其杂质，从而影响产品的质量。因此，对原料药及制剂进行质量控制是药物研发工作中的重点和难点。 

雷贝拉唑钠相关的杂质包括：雷贝拉唑砜、雷贝拉唑N-氧化物、雷贝拉唑硫醚、2-巯基苯并咪唑、雷贝拉唑羧酸体、去甲氧基雷贝拉唑，其结构式和化学式等信息如下表所示： 

雷贝拉唑砜、雷贝拉唑N-氧化物及去甲氧基雷贝拉唑为雷贝拉唑钠合成过程中较易引入的杂质，雷贝拉唑硫醚为合成雷贝拉唑钠的中间体，2-巯基苯并咪唑为合成雷贝拉唑钠的起始原料，雷贝拉唑羧酸体为雷贝拉唑钠的常见降解杂质。因此，对这六个相关物质的定量控制具有重要意义。 

专利申请CN201310468372.2公开了一种雷贝拉唑砜的合成方法，并记载了以pH7.4磷酸盐缓冲液-甲醇体系为流动相用高效液相色谱法分离测定原料药雷贝拉唑钠中的雷贝拉唑砜的含量。 

专利申请CN200910243915.4公开了以磷酸盐缓冲液-乙腈体系为流动相用高效液相色谱法测定雷贝拉唑钠冻干粉针制剂中有关物质的方法。 

专利申请201210433342.3公开了以磷酸盐缓冲液-甲醇体系为流动相用高效液相色谱法测定雷贝拉唑钠冻干粉针制剂中有关物质的方法。 

文献《HPLC-DAD-MS鉴定注射用雷贝拉唑钠杂质及其特征谱研究》(沈阳药科大学学报，2011,28(6)：433-437)利用HPLC-DAD-MS联用技术对注射用雷贝拉唑钠中的杂质进行了定性推断和定量测定，涉及的杂质包括2-巯基苯并咪唑、雷贝拉唑砜等。 

目前尚未见关于雷贝拉唑钠与上述六个杂质的分离测定方法的文献报道，寻找一种分离测定雷贝拉唑钠与该六个杂质的方法对于控制雷贝拉唑钠的质量、提高药品疗效、降低毒副作用迫在眉睫。 

发明内容

本发明的目的在于为了克服以上现有技术的不足而提供一种通过高效液相色谱法分离 测定雷贝拉唑钠及其杂质的方法，可以对雷贝拉唑钠及其相关的杂质进行分离测定。 

所述的相关杂质为雷贝拉唑砜、雷贝拉唑N-氧化物、雷贝拉唑硫醚、2-巯基苯并咪唑、雷贝拉唑羧酸体及去甲氧基雷贝拉唑，其具体的化学结构如前所述。 

本发明是通过以下技术手段实现的： 

一种通过高效液相色谱法分离测定雷贝拉唑钠及其杂质的方法，采用以下方式进行： 

色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以醋酸铵溶液-甲醇为流动相，检测波长为210～310nm，柱温为20～45℃，流动相速度为0.5～2.0mL/min，其中醋酸铵溶液为含体积分数0.1％的氨水，用乙酸调节pH值至6.5～8.5； 

样品溶液配制：采用极性溶剂分别配制含雷贝拉唑钠及其杂质各0.05～0.5mg/mL的溶液，所述极性溶剂选自水、0.001mol/L氢氧化钠溶液、甲醇或乙腈； 

测定：将溶液注入高效液相色谱仪，记录色谱图并进行分析； 

所述杂质雷贝拉唑羧酸体、雷贝拉唑N-氧化物、2-巯基苯并咪唑、去甲氧基雷贝拉唑、雷贝拉唑砜、雷贝拉唑硫醚；雷贝拉唑与各杂质的分离度均大于1.5，各杂质间的分离度均大于1.2。