[发明专利]针对人PrPc的单克隆抗体及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种针对人PrPc蛋白的单克隆抗体及其应用。

背景技术

结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一，是全球位居第三的致死性肿瘤。在西方发达国家结直肠癌发病率仅次于肺癌居于第二位，在我国结直肠癌的发病率和死亡率也呈现出上升趋势，已由80年代的第六位上升至第四位。

肿瘤的靶向治疗是近些年发展起来的治疗癌症的新方法，它很大程度上避免了传统癌症疗法如手术治疗、化疗和放疗所带来的肿瘤细胞扩散和严重毒副作用的产生。而针对肿瘤细胞表面抗原而进行的单克隆抗体治疗是肿瘤靶向治疗的主要方式，表现出了良好的肿瘤治疗效果。

细胞型朊蛋白(cellular prion protein,PrPc)，是一种广泛表达于真核生物细胞表面的糖蛋白，一共有253个氨基酸，在C末端有一个GPI结合位点，用于锚定在细胞外膜上，在181和197位有两个天门冬氨酸残基糖基化位点。在哺乳动物体内，PrPc主要表达于神经系统，在淋巴细胞、胃上皮细胞、肾脏心脏、和肌肉等非神经组织中也有表达。有报道表明，PrPc与肿瘤发生及抗药性有关，其在结直肠癌、前列腺癌、胃癌等多种癌症组织中高表达，本发明人的前期工作也表明CD44与PrPc共表达的细胞具有肿瘤干细胞的特性。此外，有报道表明PrPc对结直肠癌干细胞的肝转移也起到重要作用，因此，针对PrPc进行以单克隆抗体为基础的靶向性治疗研究，有望为癌症的治疗提供新的方案。

发明内容

本发明首先涉及一种特异性结合人细胞型朊蛋白(cellular prion protein,PrPc)的单克隆抗体Ab-5。

所述的Ab-5抗体的轻链可变区(VL)氨基酸结构如SEQ ID NO.1所示，重链可变区(VH)的氨基酸结构如SEQ ID NO.2所示，恒定区为鼠源恒定区。

SEQ ID NO.1.：

METDTLLLWVLLLWVPGSTGDIVLTQSPASLAVSLGQRATISYRASKSVSTSGYSYMHWNQQKPGQPPRLLIYLVSNLESGVPARFSGSGSGTDFTLNIHPVEEEDAATYYCQHIRELTRSEGGPSWK-NGLMLHQLYPSSHHPVLD

SEQ ID NO.2.：

MECSWVILFLLSGTGGVLSEVQLQQSGPELVKPGASVKMSCKASGYTFTDYYMKWVKQSHGKSLEWIGDINPNNGDTFYNQKFKGKATLTVDKSSNTAYMQLNSLTSEDSAVYYCAKPGRTYWGQGTLVTVSAAKTTAPSVYPLAPVCGGSRP

本发明还涉及所述的Ab-5抗体的编码核苷酸序列。所述的ab-5抗体的轻链编码序列优选为SEQ ID NO.3、所述的Ab-5抗体的重链编码序列优选为SEQ ID NO.4

SEQ ID NO.3:

CACCATGGAGACAGACACACTCCTGCTATGGGTACTGCTGCTCTGGGTTCCAGGTTCCACTGGTGACATTGTGCTGACACAGTCTCCTGCTTCCTTAGCTGTATCTCTGGGGCAGAGGGCCACCATCTCATACAGGGCCAGCAAAAGTGTCAGTACATCTGGCTATAGTTATATGCACTGGAACCAACAGAAACCAGGACAGCCACCCAGACTCCTCATCTATCTTGTATCCAACCTAGAATCTGGGGTCCCTGCCAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCTGGGACAGACTTCACCCTCAACATCCATCCTGTGGAGGAGGAGGATGCTGCAACCTATTACTGTCAGCACATTAGGGAGCTTACACGTTCGGAGGGGGGACCAAGCTGGAAATAAAACGGGCTGATGCTGCACCAACTGTATCCATCTTCCCACCATCCAGTTCTAGACGC

SEQ ID NO.4：