[发明专利]一种王不留行刺桐碱单体的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种王不留行刺桐碱单体的制备方法，属中药技术领域。 

背景技术

王不留行(Vaccaria segetalis)为双子叶植物石竹科麦蓝菜的干燥成熟种子，为常见中药，具有下乳消肿、活血通经功效。主要含有三萜皂苷，黄酮苷，环肽，类脂和脂肪酸等成分。 

制备型薄层(preparative thin-layer chromatography，PTLC)的制备量由薄层板的厚度、面积、所使用的吸附剂决定。通常使用的20cm×20cm的硅胶薄层板可以制备10-50mg的样品。该方法操作简便，类似于硅胶柱层析，可以较好地分离R_f值相差较大的样品。 

制备型高效液相色谱(preparative high performance liquid chromatography，PHPLC)以分离、富集和纯化组分为目的，是制备单体的必要手段。与其他分离手段相比，PHPLC具有以下特点：(1)柱效高，其填料为细颗粒多孔材料，提高了分离效率；(2)适宜多种样品，包括非离子型和离子型、非极性和极性、小分子和大分子、热稳定和热不稳定化合物；(3)可在线检测，根据目标产物的理化性质可配备紫外检测器(UV)、二极管阵列检测器(PDA)、荧光检测器(FD)、蒸发光散射检测器(ELSD)等不同类型检测器；(4)连续自动化操作。与分析型高效液相色谱相比，最大的操作区别就是超载进样，包括体积超载和质量超载：(1)体积超载指配制较小的样品浓度，增加进样体积，但有时样品体积过大，会使分辨能力下降；(2)质量超载指配制的样品浓度较大，但进样体积小，这要求样品组分在流动相中有良好的溶解性，防止样品在柱顶部形成沉淀。因此，实际操作时，会兼顾并结合两种操作方式。 

化合物结构解析采用的波谱技术主要包括红外光谱(IR)、紫外光谱(UV)、质谱(MS)、核磁共振(NMR)等。IR谱图以1300cm-1为分界线，较高波数区为特征频率区(4000～1300cm-1)，反映存在的官能团，较低波数区为指纹区(1300～400cm-1)，仅反映一个化合物整体特征。该方法特征性强、快速方便、样品用量少、能分析各种状态的样品。 

UV谱图可以反映结构中生色团和助色团的特性，用来推测不饱和基团的共轭关系，以及共轭体系中取代基的位置、种类和数目等。目前多采用LC/UV技术，利用二极管阵列检测器(PDA)检测，能够快速、灵敏地在线获取样品每个色谱峰的UV谱图。 

MS可以提供化合物的相对分子质量、分子式、碎片离子等化学结构信息，是天然产物结构分析可靠、灵敏的方法之一。目前多与HPLC联用(ESI-MS，APCI-MS)，应用Q-TOF作为质量分析器，就可以测得碎片离子峰的精确质量数，从而为化合物结构解析提供更多有利的信息。 

NMR技术在天然化合物结构解析中占据着极其重要的地位，可以提供丰富的化合物结构信息。一维氢谱(¹H-NMR)谱图中，通过化学位移值δ可以知道不同出峰位置的官能团，通过耦合场数J的大小和裂分峰型可以了解一个氢与其邻碳上的氢间的两面夹角，分析化合物构型与构象。一维碳谱(¹³C-NMR)谱图主要提供化合物的碳骨架信息，每条谱线一般都有它的唯一性，能够快速、准确地否定拟定的错误结构式。 

发明内容

本发明的目的是提供一种王不留行刺桐碱单体的制备方法。 

本发明的技术方案： 

所述王不留行刺桐碱的制备方法，其制备工艺为王不留行种子经石油醚脱脂，75％乙醇85℃回流提取， 减压浓缩至干，去离子水复溶，水饱和正丁醇萃取得正丁醇相，再用硅胶GF254板，以展开剂为正丁醇∶乙酸乙酯∶水＝4∶1∶5的薄层层析制备；C18柱高效制备液相分离得刺桐碱。 

所述王不留行刺桐碱的结构鉴定方法，经理化性质鉴定、红外光谱、紫外光谱、质谱、核磁共振技术确定其结构。 

附图说明

图1是紫外254nm时的TLC结果图；图2是样品的制备HPLC图；图3是样品的红外图；图4是样品的全波长扫描图；图5是样品的质谱图；图6是样品的¹H-NMR图；图7是样品的¹³C-NMR图。 

具体实施方式

实施例1：王不留行刺桐碱的制备工艺