[发明专利]一种检测四羧基苯基卟啉的方法

说明书

技术领域

本发明属于化合物检测领域，具体涉及一种检测四羧基苯基卟啉的方法。

背景技术

卟啉及其金属配合物广泛存在于自然界中，如肌红蛋白、血红蛋白中的铁卟啉、叶绿素中的镁卟啉、维生素B12中的钴卟啉等，它们与生命活动密切相关，被称为“生命的颜料”。因此，对生物体内卟啉化合物的检测对于卟啉症以及其它卟啉相关病症的诊断、环境污染的监测等具有重要的意义，也是化学研究者一直以来高度关注的一个问题。四羧基苯基卟啉是重要的水溶性卟啉化合物之一，在分析化学、分子识别、探索光合作用机理、提高光合作用效率等方面有重要应用，已引起人们的关注。目前文献报道的卟啉化合物的检测方法主要有：分光光度法、荧光法、高效液相色谱法、质谱法、色谱-质谱联用法，毛细管电泳分离-荧光检测法、薄层色谱法、荧光狭线法和磁圆二色法等方法，但这些方法都不够快速简便，而且仪器系统的操作和维护比较复杂，测试的费用也比较高，得不到普及推广。因此，发展快速简便、费用较低，而且灵敏的卟啉检测方法非常重要。

发明内容

本发明的目的是克服现有检测四羧基苯基卟啉存在的问题，提供一种快速、便宜的检测四羧基苯基卟啉的方法。

本发明实现上述目的所采用的技术方案如下：

一种检测四羧基苯基卟啉的方法，包括如下步骤：向待检测液中加入作为共反应剂的K₂S₂O₈，然后对待检测液进行电化学发光扫描。

进一步，待检测液中K₂S₂O₈的浓度为1-50mmol/L，优选为20-30mmol/L。

本发明发现四羧基苯基卟啉（TCPP）在共反应剂K₂S₂O₈的作用下，可产生稳定的且强的电化学发光信号，利用TCPP的该电化学发光性质可以检测TCPP本身，或者将TCPP作为电化学发光试剂用来检测一些对TCPP的发光强度有影响的物质，如胺类物质。

如四羧基苯基卟啉定量检测：电化学发光扫描得到发光强度，再通过发光强度与四羧基苯基卟啉浓度的标准曲线，即可得出相应的待检测液中四羧基苯基卟啉的浓度。在四羧基苯基卟啉浓度为2.0×10⁻⁷ mol·L^-1～1.0×10⁻⁵ mol·L^-1范围内具有良好的线性关系，检出限为7.0×10⁻⁸ mol·L^-1。

附图说明

图1为不同工作电极下的电化学发光图。

图2为不同共反应剂下的电化学发光图。

图3为不同K₂S₂O₈浓度下的电化学发光图。

图4为不同pH值下的电化学发光图。

图5为不同TCPP浓度下的电化学发光图。

具体实施方式

为了更清楚地说明本发明的内容，下面结合附图和具体的实施例对本发明再作进一步的说明。

本发明在样品液中加入共反应剂K₂S₂O₈，从而使四羧基苯基卟啉(全称：5,10,15,20-四(4-羧基苯基)卟啉，缩写：TCPP，CAS号：14609-54-2)产生强的电化学发光信号，且该发光信号具有良好的稳定性和重现性。

本发明的电化学发光测试是在MPI-A型毛细管电泳-电化学发光分析仪（西安瑞迈电子高科技有限公司）上进行。

电化学发光扫描检测时采用传统的三电极系统，即以玻碳电极或金电极作为工作电极，铂丝和Ag/AgCl（饱和KCl）电极分别作为对电极和参比电极。电位均以Ag/AgCl（饱和KCl）电极为参比值。

采用赛多利斯Sartorius basic pH meter PB-10 酸度计（上海人和科学仪器有限公司）测定样品液的pH。

石英管加热式自动双重纯水蒸馏器（1810B, 上海亚太技术玻璃公司）用于制备二次蒸馏水。

检测步骤如下：

1）用三氧化二铝打磨粉（0.30μm, 0.05 μm, 上海辰华仪器试剂公司）依次对玻碳电极、金电极进行抛光，再用95v%的乙醇、二次蒸馏水超声清洗，氮气吹干，备用。