[发明专利]康复新液制剂指纹图谱的检查方法及标准指纹图谱

说明书

技术领域

本发明涉及一种药品的检测方法，特别是涉及康复新液制剂指纹图谱的检查方法及标准指纹图谱。

背景技术

康复新液是以康复新为原料药经加工制成的溶液（中药剂型为合剂），现执行标准为局颁《康复新液WS₃-B-3674-2000（Z）》标准。其原料药康复新为蜚蠊（美洲大蠊）Periploneta americana干燥虫体的乙醇提取物。

原康复新液质量标准WS₃-B-3674-2000（Z）中，对康复新液产品的检查只有pH值检查一项，含量测定也只有总氨基酸一项，无法真实的反映药品的特征。中药指纹图谱是指某些中药材或中药制剂经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示其化学特征的色谱图或光谱图。中药指纹图谱是一种综合的，可量化的鉴定手段，它是建立在中药化学成分系统研究的基础上，主要用于评价中药材以及中药制剂半成品质量的真实性、优良性和稳定性。“整体性”和“模糊性”为其显著特点。

发明内容

本发明的目的在于提供一种康复新液制剂指纹图谱的检查方法，采用此方法能真实反映康复新液制剂所含特征物质，具有分离效果好，灵敏度高，能真实反映药品本身特征的特点，从而可以鉴别本品的真伪。

为达到上述目的，本发明的的技术方案如下：

    康复新液制剂指纹图谱的检查方法，采用将康复新液制剂制成供试品，通过高效液相色谱法分离检测，获得康复新液制剂的指纹图谱；

所述方法包含如下步骤：

a.对照品溶液的制备：取尿嘧啶、次黄嘌呤及肌苷对照品适量，精密称定，加水制成每1mL含尿嘧啶、次黄嘌呤及肌苷分别为10μg、25μg及50μg的混合对照溶液，即得；

b.供试品溶液的制备：取康复新液制剂，滤过，取续滤液，即得；

c.制作指纹图谱：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪分离检测，其中流动相为2%～5%的甲醇溶液（含0.07%醋酸）—甲醇，采用梯度洗脱；得到康复新液的指纹图谱。

高效液相色谱仪分离检测的条件为：填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶；流动相为3%的甲醇溶液（含0.07%醋酸）—甲醇；采用梯度洗脱：0min→10min→20min→21min→35min→42min,甲醇0%→0%→30%→50%→100%→0%；检测波长为254 nm；柱温为25℃；流速为0.6mL/min；理论板数按肌苷峰计算不低于5000。

  如图1所示，采用本发明得到的康复新液标准指纹图谱特征在于供试品特征图谱中有5个特征峰，其中3个分别与相应的参照物峰保留时间相同；与肌苷参照物峰相应的峰为S峰，特征峰3的相对保留时间为:0.95-1.05min;特征峰4的相对保留时间为0.969-1.071min;特征峰5的相对保留时间为1.064-1.176min。

本发明的优点如下：

1、本发明公开的康复新液指纹图谱检查方法及其指纹图谱，对于其特征物质进行了有效表征，提供了一种通过整体指纹图谱信息对康复新液质量进行评价的方法，避免了只测定其中一两种化学成分就对康复新液整体质量判断的片面性，使得康复新液质量控制更加准确客观。

2、本发明提供的指纹图谱检测方法分离度好，检查时间合理，重复性和稳定性好。

附图说明：

  图1为康复新液的特征对照图谱；

 图2为康复新液尿嘧啶、次黄嘌呤、肌苷含量测定的阴性对照HPLC图；

图中： 峰1：尿嘧啶，峰2：次黄嘌呤，峰3（S）：肌苷，峰4：特征峰4，峰5：特征峰5.

具体实施方式：

  下面结合附图进一步说明本发明，但本发明的保护范围不受实施例所限制。

实施例1

（1）仪器及试药

高效液相色谱仪：美国waters 2695液相色谱仪系统、惠普1200（均配有紫外检测器、四元梯度泵、在线脱气装置、自动进样器、柱温箱）。色谱柱：Wates Sunfire^TMC₁₈色谱柱（250×4.6nm，5μm）。

冰醋酸、甲醇为色谱纯，磷酸二氢钠、甘油、苯甲酸钠为分析纯，超纯水（自制）。

康复新液12批：市售产品，各生产企业3批。