[发明专利]一种结核分枝杆菌潜伏感染的诊断试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于免疫诊断领域，具体涉及一种结核分枝杆菌潜伏感染的诊断试剂盒。

背景技术

结核病是一个于人类发展史并存的古老疾病，目前仍是一个全球性的卫生问题，全世界估计有三分之一的人口感染过结核分枝杆菌，在这些感染人群中将会有10％的进展为活动性结核。每年新发病例1000万，超过300万人死亡。鉴于对人类生命健康的威胁，世界医学工作者一直没有放松对结核病的研究。结核病的发病流程一般是由健康人群到感染人群，然后经历时间长短不一的潜伏期发展成为活动性结核病。流行病学显示全球人口三分之一是结核分枝杆菌的感染者，如何及时发现、确定结核分枝杆菌的感染人群是实验现结核病一级预防的前提。

目前临床现有结核病潜伏感染诊断技术主要是PPD和IFN-γ释放实验。PPD是目前应用最广泛的一种方法，但是其结果判读时间长、结果判读主观性强、敏感性差等缺点。IFN-γ释放实验报告时间两天，检测效能较PPD有所提高，但是其操作繁琐，包括血液采集、细胞分离、细胞刺激培养、免疫学反应、上机检测等多个步骤，且其需要专用的昂贵设备，普及到基层组织不现实。

发明内容

针对现有技术所存在的问题，本发明通过蛋白芯片技术批量筛选获得能有效区分未感染人群与结核分枝杆菌潜伏感染患者的细胞因子组合，并结合检测血清中的特异性抗体，开发一种准确性高、灵敏性高、操作简便、检测速度快的结核分枝杆菌潜伏感染的血清学免疫诊断试剂盒。

本发明的目的在于提供一种结核分枝杆菌潜伏感染的诊断试剂盒。

本发明所采取的技术方案是：

一种结核分枝杆菌潜伏感染的诊断试剂盒，该试剂盒能特异性识别细胞因子Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF或IL-12p70中至少一个。

进一步的，上述试剂盒可对细胞因子Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF或IL-12p70中至少一个进行定量。

进一步的，上述试剂盒能特异性识别细胞因子Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF和IL-12p70，同时能对这5种细胞因子的含量分别进行定量。

进一步的，上述试剂盒能特异性识别细胞因子Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF和IL-12p70，同时能对这5种细胞因子的含量分别进行定量，且能特异性识别结核分枝杆菌抗原38-KDa、32-KDa、14-16-KDa和Ag85B的特异性IgG抗体。

进一步的，上述试剂盒的检测原理为ELISA原理。

本发明的有益效果是：

1)本发明通过蛋白芯片技术及生物信息学方法进行批量筛选，从中筛选获得5种表达差异最显著的细胞因子(Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF和IL-12p7)作为结核分枝杆菌潜伏感染的检测标志物，能够有效区分未感染人群与结核分枝杆菌潜伏感染患者，且其表达量高，可提高诊断的灵敏度。

2)38-KDa、32-KDa、14-16-KDa及AG85B是结核分枝杆菌的特异性菌体抗原，能够在结核分枝杆菌潜伏感染患者体内诱导相应的特异性IgG抗体产生，在检测上述5种细胞因子的同时，再联合检测这4种抗原的特异性抗体，可进一步加强诊断结核分枝杆菌潜伏感染的准确性和灵敏性。

3)利用蛋白芯片技术，将上述5种细胞因子Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF和IL-12p7)的特异性抗体以及38-KDa、32-KDa、14-16-KDa和AG85B抗原点制成芯片，制成利用ELISA原理检测的试剂盒，从而能够在48小时内检测出不同人群外周血中的细胞因子Eotaxin-2、MIG、Eotaxin、MCSF和IL-12p7，及抗原38-KDa、32-KDa、14-16-KDa和AG85B的特异性IgG抗体的含量，从而为结核分枝杆菌潜伏感染提供一种更为有效的免疫诊断手段，具备有效的准确性和灵敏性，且操作简便，检测时间快，适于推广应用。

4)ELISA原理检测血清当中的标志物，操作简单，不需要昂贵的设备，技术成熟，是普遍使用的检测原理，相对目前临床所应用的IFN-γ释放实验，本发明直接针对血清标志物，省去了细胞分离、培养、刺激、孵育等繁琐的步骤，直接针血清中的标志物进行检查，可以方便、快速、稳定地得到检测结果。

附图说明

图1为结核分枝杆菌潜伏感染者(左)和健康者(右)血清样本的芯片扫描荧光信号图；