[发明专利]PSA2蛋白在作为缺氧预适应生物标记物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及PSA2蛋白在作为缺氧预适应生物标记物中的应用，特别涉及检测PSA2蛋白含量的仪器或/和物质在制备鉴定动物或细胞是否处于缺氧预适应状态的产品中的应用。

背景技术

缺氧，是指因为组织的氧气供应不足或者用氧障碍，从而导致组织器官的代谢、功能甚至形态结构发生异常变化的病理生理过程。缺氧虽然不能作为单独的疾病存在，但却是临床各种疾病中十分常见的一类病理过程，严重时甚至会导致器官的损伤或者功能的障碍。针对这一广泛存在的病理过程，寻找提升机体抗缺氧能力的药物和措施一直是研究的热点。经过实验研究发现，动物或细胞经过非致死量的缺氧刺激后，可以对随后出现的更严重的缺氧产生耐受性，从而减轻缺氧对动物或者细胞的损伤，即会产生缺氧预适应(Hypoxic Preconditioning,HPC)的保护作用。HPC的机制可能与抗缺氧活性物质的产生或者内源性保护通路的激活等因素有关，但目前机制仍然未被阐明。蛋白质作为生物体内具体功能的执行者是生命的物质基础，在机体受到缺氧刺激之后，会引起体内蛋白质表达与含量的动态改变。因此，通过对比经过缺氧预适应刺激后动物的重要组织器官与未经过缺氧刺激的动物蛋白质的系统动态研究，有助于从蛋白质层次上揭示缺氧预适应的发生过程，可能为我们找到相关抗缺氧蛋白质，对于预防缺氧损伤有着重要的意义。生物标志物，一般指可以提供客观测定和评价的一个普通生理或病理指标，通过对它的测定便可以判断机体当前所处的生物学过程中的进程。特异性的生物标志物对于疾病的鉴定、早起诊断、预防、治疗以及愈后判定都有着积极的帮助租用，因此，寻找和发现有价值的生物标志物对于临床研究有着重要意义。鉴于缺氧损伤存在的广泛性与损伤结果的严重性，针对缺氧预适应相关蛋白生物标志物的研究便有着深远的意义。从蛋白质的层次上寻找缺氧预适应相关蛋白生物标志物，从而为后期研发抗缺氧药物提供可能的思路与靶点。

蛋白质组学，是指一种基因、细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质。蛋白质组学是一种在整体、大规模水平上研究蛋白质的特征，包括表达水平，翻译后的修饰等等，从而获得在机体受到外源性刺激前后，蛋白质整体水平上的变化情况。目前，蛋白质组学中最常用且较为先进的方法为双向荧光差异凝胶电泳(Two dimensional difference in gel electrophoresis,2D-DIGE)。它是在传统的双向电泳的基础上发展起来的新型蛋白质组学定量分离计数。DIGE实验使用三种荧光染料(Cy2Cy3和Cy5)标记蛋白质，并且在同一张凝胶上对标记好的三组蛋白质混合物进行电泳分离，是一种多通道的蛋白分离技术，消除了因为凝胶差异而造成的误差。于此同时，用Cy2标记所有蛋白质的混合物作为内参，在凝胶扫描后，使用专门的软件将蛋白质的变化与内标含量进行比对分析，采用特殊的算法，给出准确可靠的定量信息，提高了实验的重复性和准确性，减少了假阳性结果。

发明内容

本发明的目的是提供一种鉴定或辅助鉴定动物或细胞是否处于缺氧预适应状态的产品。

本发明所提供的鉴定或辅助鉴定动物或细胞是否处于缺氧预适应状态的产品，包含用于检测PSA2蛋白的物质。

在本发明中，所述缺氧预适应是指动物或细胞经过非致死性缺氧后，对再次遭遇的缺氧产生耐受，从而减轻缺氧对动物或细胞的损伤；所述耐受具体可体现为对相同的缺氧状态的耐受时间延长。

所述产品还可包含记载有如下内容的载体：

若所述待测动物或细胞中PSA2蛋白的含量高于(在统计学上显著高于)对照动物或细胞中PSA2蛋白的含量，则所述待测动物或细胞处于缺氧预适应状态或候选处于缺氧预适应状态；反之，则所述待测动物或细胞不处于缺氧预适应状态或候选不处于缺氧预适应状态；

所述对照动物或细胞为：与所述待测动物或细胞分类命名相同，且未经缺氧处理的正常的动物或细胞。

进一步，所述PSA2蛋白的含量高于对照动物或细胞中PSA2蛋白的含量，具体可为所述PSA2蛋白的含量为所述对照动物或细胞中PSA2蛋白的含量的1.2倍以上，再如2倍以上。

所述载体可为纸张，也可为电子信息载体，如U盘、软盘、CD等。

在本发明中，所述PSA2蛋白的氨基酸序列具体为序列表中序列1。

进一步，在本发明中，所述用于检测PSA2蛋白的物质为用于进行双向荧光差异凝胶电泳(2D-DIGE)的试剂和仪器，具体为如下：

(a1)三种荧光染料Cy2、Cy3和Cy5；