[发明专利]一种基于酶促异构化反应和连续色谱分离原位耦合的D‑塔格糖生产方法

权利要求书

1.一种基于酶促异构化反应和连续色谱分离原位耦合的D-塔格糖生产方法，包括以下步骤：

(1)配置pH值6～7.4的缓冲溶液；

(2)将嗜热的L-阿拉伯糖异构酶在部分缓冲溶液中充分溶解，作为酶溶液；

(3)将D-半乳糖在水中充分溶解，作为原料液；

(4)将步骤(1)、(2)、(3)中分别得到的缓冲溶液、酶溶液和原料液经混合预热后，作为进料液，所述的进料液中不含目标产物D-塔格糖；

(5)将步骤(4)中得到的进料液进入模拟移动床反应器，经原位反应和分离后，直接得到D-塔格糖产品溶液；所述模拟移动床反应器为等温操作，柱温60～80℃；所述模拟移动床反应器为四区模拟移动床反应器，每区由1～6根色谱柱组成；所述四区模拟移动床反应器的操作条件为：切换时间60～80min，I区流率1.35～1.4，II区流率0.4～0.8，III区流率0.6～0.93，IV区流率≤0.4。

2.根据权利要求1所述的D-塔格糖生产方法，其特征在于：步骤(1)中所配置的缓冲溶液每升中含有氯化钠8～8.5g、磷酸氢钠30～50g和磷酸二氢钠0.2～0.5g，调节pH值至6～7.4。

3.根据权利要求1所述的D-塔格糖生产方法，其特征在于：步骤(2)中L-阿拉伯糖异构酶为从大肠杆菌K12基因组中通过克隆方法表达阿拉伯糖异构酶制得的粗酶液。

4.根据权利要求1所述的D-塔格糖生产方法，其特征在于：步骤(4)中所配进料液中D-半乳糖浓度为10～150g/l，酶活力单位为0.1～0.28U/ml，pH值为6～7.4。

5.根据权利要求1所述的D-塔格糖生产方法，其特征在于：步骤(4)中混合预热过程在缓冲罐中进行。

6.根据权利要求1所述的D-塔格糖生产方法，其特征在于：步骤(4)中混合预热温度为60～80℃。

7.根据权利要求1所述的D-塔格糖生产方法，其特征在于：步骤(5)中模拟移动床反应器中的色谱柱填料为Sugar SP0810。