[发明专利]重组表达人呼吸道合胞病毒F1蛋白胞外区的方法及表达系统在审
| 申请号： | 201410151688.3 | 申请日： | 2014-04-16 |
| 公开（公告）号： | CN105087643A | 公开（公告）日： | 2015-11-25 |
| 发明（设计）人： | 蓝柯;余自然 | 申请（专利权）人： | 中国科学院上海巴斯德研究所 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/45;C12N5/10;C07K14/135 |
| 代理公司： | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人： | 陈静 |
| 地址： | 200025 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 重组 表达 呼吸道 病毒 f1 蛋白 胞外区 方法 系统 | ||
1.一种重组表达人呼吸道合胞病毒F1蛋白胞外区的方法，其特征在于，包括：利用果蝇S2细胞作为表达宿主，表达人呼吸道合胞病毒F1蛋白胞外区；其中，所述的人呼吸道合胞病毒F1蛋白胞外区的氨基酸序列如SEQIDNO:4所示。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，利用果蝇S2细胞作为表达宿主表达人呼吸道合胞病毒F1蛋白胞外区的方法包括：
(1)提供表达载体，所述的表达载体中含有人呼吸道合胞病毒F1蛋白胞外区的表达盒；
(2)将(1)的表达载体转化果蝇S2细胞，培养转化有所述表达载体的重组果蝇S2细胞，从而表达人呼吸道合胞病毒F1蛋白胞外区。
3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的表达盒中包括SEQIDNO:3所示的核苷酸序列。
4.如权利要求2所述的方法，其特征在于，培养转化有所述表达载体的重组果蝇S2细胞包括：
以大于2×106细胞/ml的接种量将重组果蝇S2细胞接种于培养基中，28±1℃培养，待细胞密度达到1×107细胞/ml后，补加培养基；待细胞密度再次达到1×107细胞/ml后，以诱导剂CdCl2诱导培养。
5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，诱导培养后还包括：收集细胞培养液，离心收集培养上清液，亲和层析纯化。
6.一种人呼吸道合胞病毒F1蛋白胞外区，其特征在于，其氨基酸序列如SEQIDNO:4所示。
7.一种多核苷酸，其特征在于，其编码权利要求6所述的人呼吸道合胞病毒F1蛋白胞外区。
8.如权利要求7所述的多核苷酸，其特征在于，所述的多核苷酸的核苷酸序列如SEQIDNO:3中第2-1132位所示。
9.一种表达载体，其特征在于，其包含权利要求7或8所述的多核苷酸。
10.一种重组果蝇S2细胞，其特征在于，其包含权利要求9所述的表达载体，或其基因组中整合有权利要求7或8所述的多核苷酸。
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