[发明专利]一种抗CD20单链抗体的植物种子表达系统

权利要求书

1.抗CD20单链抗体基因，它包括：轻链可变区-重链可变区-连接肽-人免疫球蛋白G的Fc片段，并且在其5’端加入了编码大麦α-Amylase的信号肽序列。

2.根据权利要求1所述的抗CD20单链抗体基因，其特征在于：它的碱基序列如SEQ ID NO.1所示。

3.一种植物表达载体质粒，它是在植物表达载体中插入了权利要求1所述的抗CD20单链抗体基因。

4.根据权利要求3所述的一种植物表达载体质粒，其特征在于：所述的植物表达载体为植物种子特异表达载体p1301b。

5.根据权利要求4所述的一种植物表达载体质粒，其特征在于：所述的植物种子特异表达载体p1301b，是由下述方法构建的：人工合成了β-phaseolin的启动子和终止子序列，并在启动子两端分别添加Xho I和Nco I酶切位点，在终止子两端分别添加Hind III和Kpn I酶切位点；并通过KpnI和Bst EII双酶切的方法从pBASTA质粒上获得35S+Bar基因；同时利用Kpn I和Bst EII双酶切pCambia1301，连入35S+Bar原件，构建中间载体p1301Bas，

再通过酶切，连接反应将β-phaseolin的启动子和终止子原件连接至p1301Bas中。

6.抗CD20单链抗体，它是由下述方法生产的：

1）将上述的一种植物表达载体质粒，转化至根瘤农杆菌EHA105中；

2）再将根瘤农杆菌转染至植物中；

3）培育所述的植物，采集种子，提取抗CD20单链抗体蛋白。

7.根据权利要求1所述的抗CD20单链抗体，其特征在于：所述的植物为拟南芥、红花、玉米或亚麻芥。

8.权利要求6所述的抗CD20单链抗体在制备治疗非霍奇金氏淋巴瘤及自身免疫性疾病药物中的应用。