[发明专利]一种用于N-糖蛋白去糖基化的糖苷酶及其应用有效
| 申请号： | 201410134277.3 | 申请日： | 2014-04-02 |
| 公开（公告）号： | CN104974994B | 公开（公告）日： | 2019-02-26 |
| 发明（设计）人： | 陈力;孙桂芹;策力木格 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/70;C12N9/22;C12P21/02;C12N9/08 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 吴桂琴 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 糖蛋白 去糖基化 糖苷酶 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种N-糖苷酶在用于切除糖蛋白底物上的N-连接糖链中的应用，所述的N-糖苷酶的氨基酸序列为SEQ ID NO 1所示的序列；
所述的糖蛋白底物是高甘露糖型糖链N-糖蛋白；
所述的N-连接糖链的接点是带有由α-1-3糖苷键连接的岩藻糖。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的糖蛋白底物是杂合型糖链N-糖蛋白。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的糖蛋白底物是HRP糖蛋白。
4.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的N-糖苷酶通过下述方法制备：
1)获得并扩增所述的SEQ ID NO 1的N-糖苷酶的基因序列；
2)构建含有所述的SEQ ID NO 1的N-糖苷酶的基因序列的重组载体；
3)表达所述的N-糖苷酶；
4)分离纯化并鉴定。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的制备方法中，表达的系统是细菌、酵母或者昆虫表达系统。
6.如权利要求4所述的应用，其特征在于，所述的制备方法中，包括微生物发酵生产，利用生物工程技术在细菌、酵母、昆虫表达系统中的表达和生产。
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