[发明专利]凝结芽孢杆菌和干酪乳杆菌复合菌剂的制备

说明书

技术领域

本发明属于饲料微生物技术领域，涉及一种以豆粕、麸皮、玉米粉为基质，以益生菌凝结芽孢杆菌HM-09(Bacillus coagulansHM-09)和干酪乳杆菌HM-09(Lactobacillus casei HM-09)进行固态发酵的应用技术，此技术可广泛应用于动物益生菌微生态等方面。

背景技术

目前，益生菌制品的研究和应用正日益受到人们的关注，比较常见的为采用益生菌直接与液态牛乳和豆乳发酵，得到功能性的酸牛奶或者酸豆奶，常用菌种为乳酸菌和保加利亚乳杆菌，其余则采用液态发酵，直接收集益生菌菌体，制作成益生菌粉剂、片剂或者胶囊。采用液态发酵会产生大量的废水，对环境污染较大，后处理比较困难，机器设备操作繁琐。而开发新的菌种、优化培养条件，提高益生菌产品中活菌含量，并提高益生菌活力，应是益生菌领域关注的发展方向。

公开号为103202391A的中国发明专利《一种有效预防及改善牛乳房炎的复合乳酸菌微生态制剂》，公开了一种预防及改善牛乳房炎的复合微生态制剂，此复合微生态制剂由一株干酪乳杆菌HM-09(L.casei HM-09)和一株植物乳杆菌HM-10（L.plantarum HM-10）组成，属于饲用微生态制剂领域。每克复合微生态制剂中干酪乳杆菌HM-09(L.caseiHM-09)质量分数为10%，植物乳杆菌HM-10（L.plan tarum HM-10）质量分数为10%，其余80%为沸石粉，同时复合微生态制剂中L.casei HM-09活菌数量≥2.5×10⁸cfu/_g，L.plan tarum HM-10活菌数量≥2.5×10⁸cfu/g。饲喂该复合微生态制剂能够有效预防及改善牛乳房炎，而且乳房炎越严重的乳区得到改善的效果越明显;同时能够增强动物机体免疫，有效降低患乳房炎牛乳中的体细胞数，提高牛奶品质。

公开号为103255080A的中国发明专利《一株用于乳仔猪养殖的优良凝结芽孢杆菌及其应用》，公开了一株用于乳仔猪养殖的优良凝结芽孢杆菌HM-09（Bacillus coagulans HM-09），属于饲用微生态制剂领域。凝结芽孢杆菌在饲料中的添加量为1×105cfu/g。本发明的凝结芽孢杆菌HM-09（Bacillus coagulans HM-09）已于2012年10月29日，在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物菌种保藏中心（国家专利局指定专利微生物保藏中心）保藏，保藏号：CGMCC No.6729。凝结芽孢杆菌HM-09饲喂断奶仔猪，能显著提高生长速度，降低料重比，减少断奶仔猪腹泻发生率，提高仔猪饲料利用率，提高断奶仔猪养殖的经济效益。

本申请采用凝结芽孢杆菌HM-09(Bacillus coagulans)和干酪乳杆菌HM-09混合固态发酵豆粕、麸皮和玉米粉，采用凝结芽孢杆菌HM-09和干酪乳杆菌HM-09进行混合固态发酵豆粕，可生产出一种具有酸香气味的发酵制品，改善动物饲料的适口性。且其生产成本低，投资的资金较少，在下游处理方便，污染小，设备结构简单、易操作。

发明内容

本发明目的在于提供一种采用凝结芽孢杆菌HM-09和干酪乳杆菌HM-09进行混合固态发酵豆粕、麸皮和玉米粉，可广泛应用于微生态领域的复合菌剂，并提供该复合菌剂的制备方法，此方法可以生产出具有特殊酸香味，且豆粕、麸皮和玉米粉发酵产品的活菌数高，豆粕蛋白质的降解率高。此制备方法生产成本低，可以提高经济效益并且操作简单。

本发明是通过下述技术方案实现的：

一种以豆粕、麸皮和玉米粉为基质可广泛应用于微生态领域的凝结芽孢杆菌和干酪乳杆菌复合菌剂，其制备方法：包括凝结芽孢杆菌HM-09和干酪乳杆菌HM-09的种子培养及其固态发酵培养。所述种子培养基为：蛋白胨2-5%，葡萄糖2-5%，加水至100%，pH7.0-7.2。固态发酵培养基质量比例组成为：豆粕：麸皮：玉米粉=10:8-10:0.5-1，水份含量控制在40-75%，pH7.0-7.2。

所述种子培养条件：凝结芽孢杆菌HM-09于恒温箱中35-38℃，160-180转摇床培养20-24h；干酪乳杆菌HM-09于恒温箱中33-38℃培养20-24h。

所述固态发酵培养方法为：固态发酵培养基上首先接种凝结芽孢杆菌HM-09种子液，接种量为2.0-8.0%（v/w），控制发酵温度30-37℃,湿度60-85%，单菌发酵0-12h，再添加干酪乳杆菌HM-09，接种量为2.0-8.0%（v/w），其他条件不变，再发酵12-36h，共计发酵总时间为24-48h。