[发明专利]一种从番石榴叶中分离出的新化合物、制备方法及用途

说明书

技术领域

本发明涉及医药、功能食品领域，特别是从番石榴叶中制备的新化合物具有降糖功能，从而用于2型糖尿病人的防治。 

背景技术

2型糖尿病是多种致病因子作用于机体导致胰岛功能减退、胰岛素抵抗等而引发的一系列代谢紊乱综合征。世界卫生组织指出，世界范围内的糖尿病形势仍然非常严峻，而发展中国家的形势尤其令人担忧。 

番石榴叶作为民间用药用来预防和治疗糖尿病已有悠久的历史，有大量的关于番石榴叶在二型糖尿病病人疾病的防治过程的文献报道，且大量的临床试验证明其疗效确切，因此国内外许多学者对其降糖效果展开了大量的研究，但到目前为止，番石榴叶中降血糖活性成分和作用机制尚未得到确切证实。番石榴叶资源在我国非常丰富，如果对番石榴叶进行深入系统的研究，确定其降糖作用物质基础、鉴定其降糖单体的化学结构、明析其作用机理，并在此基础上开发出防治2型糖尿病发生发展的降糖药物或功能食品，不仅可以充分利用番石榴叶资源，而且还可以减少糖尿病人的痛苦、创造出较大的经济效益和社会效益。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种从番石榴叶中分离出的新化合物。化合物的化学名称为：3α, 22α二羟基齐敦果烷-12-烯-30酸（3α, 22α-dihydroxyolean-12-en-30-oic acid），经活性实验证明该化合物具有很好的促葡萄糖摄取作用。 

本发明提供的新化合物是由番石榴叶经过反复硅胶柱层析、薄层层析和结晶分离所得，其化学结构式由波谱解析法确定如下： 

该化合物的制备方法包括以下步骤;

（1）称取粉碎的番石榴叶粉末，加入体积10倍的石油醚，回流提取两次后过滤，滤渣挥干溶剂后加入体积10倍的氯仿在60°C回流提取3次，过滤，氯仿溶液减压回收溶剂得氯仿提取物，备用。

（2）氯仿提取物进行硅胶柱层析分离，采用石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，石油醚和乙酸乙酯的体积比例依次为50:1，20:1，10:1，5:1，1:1，0:1。经TLC检测，显色，合并相同组分，经甲醇重结晶得该化合物。 

    该新化合物作为制备降糖药物或降糖保健食品或功能食品添加物的用途。 

  

四、具体实施方式  

本发明所述的新化合物是从番石榴叶经过反复硅胶柱层析、薄层层析和结晶等方法分离出来。以下结合实际情况，对本发明的具体实施方式进行详细说明：

1.        提取：称取粉碎的番石榴叶粉末3.2kg，加入体积10倍的石油醚，回流提取两次后过滤，滤渣挥干溶剂后加入体积10倍的氯仿在60°C回流提取3次，过滤，氯仿溶液减压回收溶剂得氯仿提取物21.8g，备用。

  

2.        柱层析分离及溶剂重结晶: 氯仿提取物进行硅胶柱层析分离，采用石油醚-乙酸乙酯进行梯度洗脱，石油醚和乙酸乙酯的体积比例依次为50:1，20:1，10:1，5:1，1:1，0:1，TLC检测，显色，合并相同组分，共分得10粗组分。第四组分1.2g再次经硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯10:1，5:1梯度洗脱，从石油醚-乙酸乙酯10:1组分经甲醇重结晶得该化合物12.7mg。

  

3.        化合物结构鉴定：

化合物为无色结晶性粉末，薄层层析展开后，硫酸烘烤显紫红色，另外醋酐-浓硫酸反应阳性，最终显示紫红色，说明该化合物为三萜类化合物。

电子轰击质谱给出分子离子峰472，及大气压化学电离质谱给出准分子离子峰471.2 ([M-H]^-)说明化合物的分子量为472 amu。结合化合物的碳谱和DEPT谱共显示其含有7个甲基(δ 15.1, 16.4, 22.2, 24.7, 25.8, 28.2 and 28.6)、9个亚甲基、6个次甲基(其中，2个连氧 δ 73.7 and 74.5, 1个为烯碳，其余三个为sp³杂化)和8个季碳。氢谱碳谱清楚的揭示化合物为一齐敦果烷型三萜类化合物，分子式为C₃₀H₄₈O₄ （不饱和度Ω=7），分子中含有两个羟基、一个羧基和一个双键（在12、13位置）。