[发明专利]Lycium exsertum组织培养及快速繁殖方法

权利要求书

1.一种Lycium exsertum组织培养及快速繁殖方法，其特征在于该方法包括如下步骤：

A、外殖体处理采用茄科枸杞属（Lycium exsertum）幼嫩茎段作为外殖体，剪去叶片，留少量叶柄，每2-3个芽剪成一段，将茎段洗去污渍，后用水冲洗干净，冲洗时间为5-10min，然后将其放入超净工作台中,进行消毒，消毒后剪去茎段两端，放于培养皿中备用；

B、初代培养

以MS培养基为基础培养基进行初代培养；

C、继代培养

培养材料为初代培养获得的单苗或丛芽，以MS为基本培养基，添加6-苄氨基腺嘌呤与吲哚-3-乙酸；

D、生根培养：以MS为基本培养基；

E、炼苗移栽

炼苗：将生根培养的苗木在与移栽环境相同的条件下闭瓶炼苗5-7d；移栽：炼苗移栽基质以泥炭、蛭石、珍珠岩1：1：1混合配制，将苗子移栽到装有基质的花盆中，浇透水后，覆膜。

2.根据权利要求1所述的Lycium exsertum组织培养及快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤A消毒方案如下：先用75%酒精振荡消毒5s，再用0.1 %升汞溶液消毒6—6.5分钟，最后用无菌水清洗3-4次。

3.根据权利要求2所述的Lycium exsertum组织培养及快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤B的培养过程为以MS培养基为基础培养基，添加0.05mg/L的萘乙酸、3%蔗糖和4g琼脂，使用NaOH或HCl将培养基pH值调至5.8，培养条件是光强为3000lx全光照24h，温度为25℃，湿度为70%RH。

4.根据权利要求3所述的Lycium exsertum组织培养及快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤C继代培养条件如下：以MS培养基为基础培养基，添加0.1 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤和0.05 mg/L的吲哚-3-乙酸，使用NaOH或HCl将培养基pH值调至5.8；培养条件是光强为3000lx全光照24h，温度为23℃，湿度为70%RH。

5.根据权利要求4所述的Lycium exsertum组织培养及快速繁殖方法，其特征在于：所述6-苄氨基腺嘌呤和0.05 mg/L的吲哚-3-乙酸的浓度比为2:1。

6.根据权利要求5所述的Lycium exsertum组织培养及快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤D生根培养条件：使用步骤C继代培养植株叶片为材料，以1/4的MS培养基为基础培养基，添加1.5%蔗糖和4g琼脂，使用NaOH或HCl将培养基pH值调至5.8；培养条件是光强为3000lx下12h光暗交替，温度为23℃，湿度为70%RH。

7.根据权利要求5所述的Lycium exsertum组织培养及快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤D生根培养条件：使用步骤B或步骤C的培养植株叶片为材料进行丛芽增殖培养，以1/2MS培养基为基础培养基，添加1.0 mg/L的6-苄氨基腺嘌呤、0.5 mg/L的吲哚丁酸；培养条件是先在25℃下暗培养7d，然后在25℃、光强为3000lx全光照，湿度为70%RH下培养至丛芽长出。

8.根据权利要求6或7所述的Lycium exsertum组织培养及快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤E中炼苗移栽对基质用0.1%多菌灵浇透，移栽时将炼好苗的植株的根部浸入0.1%多菌灵和0.1 g/Ld的NAA混合溶液中浸泡10min。

9.根据权利要求8所述的Lycium exsertum组织培养及快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤E中组培苗移栽初期，设置遮阳网，光强度为全光照时的30%。

10.根据权利要求9所述的Lycium exsertum组织培养及快速繁殖方法，其特征在于：所述步骤E移栽前两日遮光密封保湿培养，第三日开始每日通风，通风时间逐日加长，同时逐渐增加光强，直到全天开放；适时浇水，隔日喷少量 0.1%多菌灵溶液，7天后喷1/4的MS营养液，待幼苗成活后逐渐全光照。