[发明专利]丹参酸甲酯磺酸钠的制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及药物领域，具体涉及丹参酸甲酯磺酸钠的制备方法和应用。

背景技术

丹参，又名血参、赤根、红根、血生根，为唇形科植物(Salvia miltiorrhza)的根茎，其入药始载于《神农本草经》。中医认为，其味苦微寒，具有活血痛经、祛瘀止痛、清心除烦、凉血消痈的功效，适用于治疗月经不调、痛经、经闭、崩漏、带下、冠心病、动脉粥样硬化、高血脂、心绞痛、跌打淤血、失眠、神经衰弱、乙肝等疾病，为妇科、内科及外伤科证属血瘀兼热者常用。

现代药学研究表明，丹参中化学成分复杂，主要为水溶性丹参酚酸类和脂溶性二萜醌类丹参酮类化合物。其中，丹参酮类化合物主要包括丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、丹参酮ⅡB、异丹参酮Ⅰ、异丹参酮ⅡA、隐丹参酮、异隐丹参酮、甲基丹参酮、羟基丹参酮等。

丹参酮ⅡA是重要的丹参有效成分。丹参酮ⅡA磺酸钠(Sodium TanshinoneⅡA Sulfonate,STS)，则是丹参酮ⅡA经磺化后得到的水溶性磺酸盐。由于磺酸基的引入，在治疗冠心病、心绞痛、心肌梗塞等疾病方面，丹参酮ⅡA磺酸钠相比丹参酮IIA具有更多的优越性，从而成为主要的心血管类丹参提取物中药。

丹参酮IIA是制备丹参酮IIA磺酸钠的原料，从丹参药材饮片提取，故难免混有少量、或极低含量其他结构较为相似的组分，如丹参酮ⅡB、丹参酮I、隐丹参酮、紫丹参甲素等。若要制备高纯度丹参酮IIA磺酸钠，则获得这些极低含量相关组分标准品、以及这些标准品在丹参酮IIA磺酸钠原料相关成分含量控制中的应用，具有重要意义。

但是，由于该类化合物结构复杂，化学全合成难度大，要获得高纯度对照品成为挑战。有研究报道从丹参酮ⅡA磺酸钠原料药中提取相关物质，由于其含量极低，HPLC纯度通常不到百分之一，采用高效液相法分离提取，工作量大、难度高。因此，丹参提取物中极低含量组分的高纯度标准品规模化制备，及其在丹参酮IIA磺酸钠原料药相关物质含量监控中的应用成为本领域长期以来难以解决的技术难题。

丹参酸甲酯也是丹参脂溶性二萜醌类化合物有效成分之一，并且尚未有技术大量制备丹参酸甲酯磺酸钠的报道。现有技术中专利CN200610039234.2“一组从丹参中提取的二萜醌类化合物的磺化物在医药中的应用”表明丹参酸甲酯磺酸钠可以应用于治疗冠心病（包括心绞痛，心肌梗死，心律失常，心肌血供应不足）和抗菌消炎等。因此，定量控制丹参酸甲酯磺酸钠，对丹参酮ⅡA磺酸钠原料的质量保证具有重要意义。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于为了克服现有技术中丹参酸甲酯磺酸钠提纯困难、效率低、提取量低的缺陷，提供了丹参酸甲酯磺酸钠的制备方法和应用。本发明的制备方法的制备能力强、制备量大、周期短、纯度高、效率高，并且减少了有机溶剂的使用，工艺操作连续性强易于进行质量控制和生产。

本发明通过以下技术方案解决上述技术问题。

本发明的丹参酸甲酯磺酸钠的结构如下式所示：

本发明提供了丹参酸甲酯磺酸钠的制备方法，其包括下述步骤：采用高效液相反相色谱法分离丹参酮类磺化液，即可；

其中，高效液相反相色谱法的条件如下：

流动相A为0.1%三乙胺-水、流动相B为0.1%三乙胺-甲醇；或，流动相A为0.1%二乙胺-水、流动相B为0.1%二乙胺-甲醇；或，流动相A为0.1%氨水、流动相B为甲醇；百分比为组分占流动相的体积百分比；检测波长为271nm，保留时间为35～50min。

其中，所述的高效液相反相色谱法较佳地包括富集纯化、中间纯化和精制纯化，其中，所述的富集纯化的条件优选如下：

流动相A为0.1%三乙胺-水、流动相B为0.1%三乙胺-甲醇；或，流动相A为0.1%二乙胺-水、流动相B为0.1%二乙胺-甲醇；或，流动相A为0.1%氨水、流动相B为甲醇；流速为80～120mL/min（较佳地为100mL/min），检测波长为271nm；

将丹参酮类磺化液与流动相A按体积比为1:4的混合物上样25min，80%流动相A+20%流动相B（体积分数）平衡1min，以流动相A和流动相B按照下述体积比进行线性梯度洗脱40min：80%A+20%B→40%A+60%B，再以100%流动相B再生10min，收集保留时间为42～50min的洗脱液得到富集纯化样品溶液；