[发明专利]固相微萃取与气相色谱质谱联用技术快速检测盐酸克伦特罗的方法

说明书

技术领域

本发明涉及农产品质量检测领域。更具体地，涉及一种固相微萃取与气相色谱质谱联用技术快速检测盐酸克伦特罗的方法。 

背景技术

盐酸克伦特罗为一种人工合成的兴奋剂，具有扩张支气管的作用，常用来防治哮喘、肺气肿等肺部疾病。当其应用剂量达到治疗量的5～10倍时，具有能量重分配作用，可使肌肉合成增加，脂肪沉积减少，因此在中国俗称为“瘦肉精”。由于盐酸克伦特罗有明显的促进生长、提高瘦肉率及减少脂肪的效果，目前被应用于畜牧业作为瘦肉精使用。但是盐酸克伦特罗对人类的健康有严重的影响，因此盐酸克伦特罗的检测对畜牧农产品的质量监控至关重要。 

目前，我国公布的盐酸克伦特罗检测技术标准中样品前处理方法主要以固相萃取、液液萃取为主，分离分析方法主要以色谱质谱联用技术、酶联免疫技术为主。这些标准检测法检出限低，结果准确，但是样品前处理方法耗时长，成本高，极大地阻碍了瘦肉精普查的进行。 

另外，近年来各国政府对环境的关注度日益提高，大力倡导“绿色GDP”、“环境的可持续发展”等理念，在此背景下，标准法中大量有机溶剂的使用日益凸显其对环境的不友好性。 

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服现有盐酸克伦特罗标准检测法样品前处理方法耗时长、成本高、大量有机溶剂对环境不友好等技术不足，提供一种快速、准确、环保、低成本的检测盐酸克伦特罗的方法。 

本发明的目的在于提供一种利用固相微萃取与气相色谱质谱联用技术快速检测盐酸克伦特罗的方法。 

本发明上述目的通过以下技术方案实现： 

一种固相微萃取与气相色谱质谱联用技术快速检测盐酸克伦特罗的方法，包括如下步骤： 

S1.将待测样品洗净绞碎后，将可拆卸式固相微萃取探针插入绞碎后的待测样品中，室温静置萃取10～120min； 

S2.萃取后的探针插入装有N-特丁基二甲基硅烷-N-甲基三氟乙酰胺的密封瓶中，在30～100℃下顶空衍生10～60min； 

S3.衍生结束后直接进样，解析2～12min，利用气相色谱-质谱联用技术测定待测样品中的盐酸克伦特罗，并用外标法定量。 

优选地，S1所述室温静置萃取的时间为45min。 

优选地，S2所述顶空衍生的条件为50℃下顶空衍生30min。 

优选地，S3所述解析的时间为5min。 

所述可拆卸式固相微萃取探针优选为申请号为201010224148.5所述的萃取头可拆卸式固相微萃取探针。 

为了使萃取效果达到最优，每次使用前，需将可拆卸式固相微萃取探针插入固相微萃取套管中老化10min。 

萃取时间和顶空衍生的条件(包括温度和时间)对本发明至关重要，原因在于：如萃取时间不像一股意义上的那么简单，其实要比想象的更复杂，虽然萃取时间直接涉及到萃取效率和浓度的关系，但是他们的关系未必一定是成正比的，本发明经过大量的研究和探索，发现在一定范围内随着萃取时间的延长，萃取峰面积不断增加，之后随着萃取时间的延长反而下降，但是下降到一定程度后，却又有一定幅度的上升，因此萃取时间和顶空衍生的条件对检测结果的影响是未知的，更是不可预测的。并且，萃取时间、顶空衍生的时间和温度各单因素并不是单独起作用的，而是相互影响、相互制衡的。 

正如发明人实验发现，根据单因素优选实验得出的最优的萃取时间为60min；最优的衍生条件为50℃顶空衍生36min；最优的解析时间为5min。但是在研究的过程中发现这并不是最优的工艺条件。发明人经过大量的研究和探索，得出一种最优的检测工艺，如下：将新制备并老化好的可拆卸式固相微萃取探针插入加标猪肉中，室温静置萃取45min，萃取后的探针插入装有MTBSTFA的密封样品瓶中，50℃顶空衍生30min，衍生结束后直接进样，解析5min，利用气相色谱-质谱联用技术测定盐酸克伦特罗，并用外标法定量。 

优选地，S3所述利用气相色谱质谱联用技术测定的条件如下： 

气相色谱条件：色谱柱为Agilent公司的Agilent HP-5 MS气相毛细管柱(19091S-433)，30m×0.25mm×0.25μm；载气为氦气，纯度≥99.999％；采用不分流进样，进样口温度250℃，柱流速1.2mL/min；GC/MS总运行时间为12.83min，升温程序如下： 

S1.初始温度设定值为80℃，保持时间0min； 

S2.梯度1：升温速率为30℃/min，温度设定值为220℃，保持时间0min；