[发明专利]一种芭蕉根的质量检测方法有效
申请号: | 201410082999.9 | 申请日: | 2014-03-07 |
公开(公告)号: | CN103823000A | 公开(公告)日: | 2014-05-28 |
发明(设计)人: | 王祥培;徐峰;吴红梅 | 申请(专利权)人: | 贵阳中医学院 |
主分类号: | G01N30/06 | 分类号: | G01N30/06;G01N30/02 |
代理公司: | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人: | 汤东凤 |
地址: | 550002*** | 国省代码: | 贵州;52 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 芭蕉 质量 检测 方法 | ||
技术领域
本发明属于中药原材料技术领域,具体而言,涉及一种芭蕉根的质量检测方法。
背景技术
糖尿病是一种由于胰岛素分泌缺陷及(或)其生物学作用障碍引起的以高血糖为特征的代谢性疾病,糖尿病已经成为世界上继肿瘤、心脑血管病之后第三位严重危害人类健康的慢性疾病。因此应以积极预防为主,其中芭蕉根具有良好的抗糖尿病的作用。
但芭蕉根药材如果没有严格的质量标准,得到的产品不能确保其质量,结果必将影响该药物的临床疗效;所以为控制芭蕉根的治疗糖尿病作用,确保用药的安全、有效及产品质量的稳定,制定一个严格可靠的检测方法成为保证药品质量的基本要求。目前有测定芭蕉根中多糖及皂苷的含量报道,而本专利中检测的羽扇豆酮和β-谷甾醇均为抗糖尿病的活性成分,通过检测芭蕉根药材中羽扇豆酮和β-谷甾醇的含量,从而确保芭蕉根药材的质量,目前未见研究报道。此外,由于芭蕉根中的成分复杂,如何采用合适的条件来检测羽扇豆酮和β-谷甾醇的含量也存在技术上的难题。
发明内容
本发明的目的是提供一种芭蕉根质量检测方法,为了实现本发明的目的,拟采用如下技术方案。
本发明一方面涉及一种芭蕉根质量检测方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)对照品溶液的制备:分别精密称取羽扇豆酮对照品和β-谷甾醇对照品,加甲醇制成每1mL各含0.4032mg和0.4480.mg的对照品溶液;
(2)供试品溶液的制备:取芭蕉根粉末1.0g,精密称定,置100mL圆底烧瓶中,加甲醇溶液50mL,回流提取90分钟,过滤,再加甲醇50mL,加热回流90min,过滤,合并滤液,放冷,水浴蒸干,残余物加甲醇使溶解,转移至10mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得供试品溶液;
(3)测定:分别精密吸取对照品溶液0.5μL与供试品溶液1μL,注入超高效液相色谱仪,测定;色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,AgilentC18column(2.1mm×100mm,1.8μm);以甲醇:0.1%乙酸水=100:4为流动相;流速0.1mL·min-1;检测波长为206nm;柱温为50℃。
在本发明的一个优选实施方式中,所述的检测是定量检测。
采用本发明的方法,能有效检测芭蕉根中的活性成分,对于控制芭蕉根的药材质量具有十分重要的意义。
具体实施方式
实施例1:
芭蕉根药材中羽扇豆酮和β-谷甾醇的检测
(1)仪器与试药
仪器:超高效液相色谱仪(安捷伦1290)、HH-6数显恒温水浴锅(常州澳华仪器有限公司)、天平(AB204-S)。
试剂:乙腈(美国TEDIA公司)色谱纯、甲醇(美国TEDIA公司)色谱纯、娃哈哈纯净水。
对照品:羽扇豆酮对照品(经高效液相法检测纯度大于98%);β-谷甾醇对照品(上海源叶生物科技有限公司,批号为20120214,纯度大于98%)。
样品:本发明药材(芭蕉根,贵阳中医学院生药实验室自行采集)。
(2)对照品溶液的制备
分别精密称取羽扇豆酮对照品和β-谷甾醇对照品,加甲醇制成每1mL各含0.4032mg和0.4480mg的对照品溶液。
(3)色谱条件优选
色谱波长的优选:分别比较210nm、206nm、204nm、254nm等波长下芭蕉根中羽扇豆酮和β-谷甾醇的分离度和理论塔板数及其峰面积,结果证明在波长206nm处,芭蕉根中羽扇豆酮和β-谷甾醇的分离度最好,峰面积最大,干扰因素最小。
色谱柱温度的优选:本实验比较了25℃、35℃、45℃、50℃、55℃等柱温对芭蕉根中羽扇豆酮和β-谷甾醇的影响,实验结果表明50℃柱温条件下,分离度好,保留时间短,理论塔板数高。
流动相的选择:本实验参照2010版《中国药典》方法比较甲醇-乙腈、乙腈-0.1%醋酸、甲醇-水等不同组分、不同比例的流动相,芭蕉根中羽扇豆酮和β-谷甾醇都不能达到完全分离。而本实验设计甲醇-1%醋酸水的等度洗脱,可达到两个成分间的完全分离。最终确定最佳的色谱条件为:甲醇:0.1%乙酸水=100:4为流动相,流速为0.1mL·min-1,检测波长为206nm,柱温为50℃。
(4)系统适应性试验
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