[发明专利]一种大枣渣粗多糖的分离纯化工艺

说明书

技术领域

本发明属于天然产物有效成分分离纯化领域，具体涉及一种大枣渣粗多糖的分离纯化工艺。

背景技术

大枣是制备大枣香料的工业原料，制完枣香料后剩余的枣渣则被丢弃或用作饲料，造成资源浪费。变废为宝，利用枣渣提取大枣多糖，既有利于节约资源，又有利于提高经济效益。

大枣多糖可用作高档食品、保健品、药品的原料及添加剂，可调节机体生理机能，具有增强免疫、改善血气、抗艾抑癌、抗氧化、延缓衰老等多种功效。据报道，尤适于生物或化学因素导致的免疫功能低下或免疫功能失衡人群、肿瘤综合治疗人群、放疗化疗后的人群、白细胞低下的人群。

从大枣渣中提取出粗多糖后还要进一步进行分离纯化成纯品，是将粗多糖中的蛋白质及其他杂质去除的过程，纯品的产量及质量与纯化方法、设备、工艺条件等诸多因素有关。常用的Sevag试剂法，要经过多次反复操作，不仅造成多糖的严重损失，而且浪费大量试剂，增加了生产成本；超滤法，虽然纯化率高，但价格高，适于少量研究分析，尤其是滤膜有时候也对多糖有吸附；层析分离法所用层析柱价格也较高，增加了生产成本，影响经济效益。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有大枣渣粗多糖分离纯化工艺存在的不足，提供一种生产成本低、工艺条件温和、分离纯化效率高、纯度高、产量高的大枣渣粗多糖的分离纯化工艺。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现：

一种大枣渣粗多糖的分离纯化工艺，其具体步骤是：

⑴酶解：将初步提取的大枣渣粗多糖溶解于8-10倍量去离子水中，加入大枣渣粗多糖量1%-2%的复合酶（复合酶包括0.5%-1.5%胰蛋白酶和0.5%-1.5%木瓜蛋白酶），于50-60℃和pH6.5-7的条件下，水解1.5-2h，然后迅速升温至98℃灭酶，并保温0.5-1h，置于高速离心机中，离心分离0.5h，弃去不溶物，得清液；

⑵浓缩：将所得清液加入真空浓缩机中，低温减压浓缩至原清液体积的1/5-1/4，得浓缩液；

⑶脱色：将所得浓缩液投入脱色釜中脱色，在搅拌的条件下加入20%量的脱色试剂（3%-10%双氧水），混合均匀，静置脱色，得大枣多糖脱色液；

⑷除蛋白：在所得浓缩液中，加入等量的蛋白去除剂（辛醇：三氯乙酸=5:1，Ｖ/Ｖ），振荡30min，静置10-20min，再离心10-20min，以去除蛋白等杂质，重复处理2-3次，静置，待分层稳定后，将水相和有机相分开，有机相回收可循环使用，水相为大枣多糖澄清液；

⑸透析：将大枣多糖澄清液装入透析设备的透析袋中，用去离子水透析48h，取出透析内液；

⑹醇析：将透析液依次通过75%、80%、85%、95%、无水乙醇梯度洗涤，各梯度时长5h，然后离心分离，沉析物为大枣多糖；

⑺冷干：将沉析物置于冷冻干燥机中，在-55℃和减压条件下，冷冻干燥，然后粉碎，过120目筛，得到大枣多糖纯品。

本发明的有益效果是：

本发明将大枣渣粗多糖进行逐步快速分离纯化，得到的产品纯度高，产量高；生产成本低，工序简单，可操作性强，连续性好，条件温和，所用有机溶剂少，安全环保率高，经济效益好。

具体实施方式

结合实施例进一步对本发明进行阐述，对本发明不构成限制。

实施例1

一种大枣渣粗多糖的分离纯化工艺，其具体步骤是：

⑴酶解：将初步提取的大枣渣粗多糖溶解于8倍量去离子水中，加入大枣渣粗多糖量1%的复合酶（复合酶包括0.5%胰蛋白酶和0.5%木瓜蛋白酶），于50和pH7的条件下，水解2h，然后迅速升温至98℃灭酶，并保温1h，置于高速离心机中，离心分离0.5h，弃去不溶物，得清液；

⑵浓缩：将所得清液加入真空浓缩机中，低温减压浓缩至原清液体积的1/5，得浓缩液；

⑶脱色：将所得浓缩液投入脱色釜中脱色，在搅拌的条件下加入20%量的脱色试剂（3%双氧水），混合均匀，静置脱色，得大枣多糖脱色液；

⑷除蛋白：在所得浓缩液中，加入等量的蛋白去除剂（辛醇：三氯乙酸=5:1，Ｖ/Ｖ），振荡30min，静置20min，再离心10min，以去除蛋白等杂质，重复处理3次，静置，待分层稳定后，将水相和有机相分开，有机相回收可循环使用，水相为大枣多糖澄清液；

⑸透析：将大枣多糖澄清液装入透析设备的透析袋中，用去离子水透析48h，取出透析内液；

⑹醇析：将透析液依次通过75%、80%、95%、无水乙醇梯度洗涤，各梯度时长5h，然后离心分离，沉析物为大枣多糖；