[发明专利]一种茴茴蒜愈伤组织培养方法

权利要求书

1.一种茴茴蒜愈伤组织培养方法，其特征在于按照如下步骤进行：

(1)外植体的选择与灭菌：以茴茴蒜茎为外植体。采集健康无病害的茴茴蒜茎，无菌水清洗3遍，在70％～75％乙醇中浸泡25～45s，随后放入0.1％～0.15％的HgCl₂溶液中浸泡5～15min，随后用无菌水清洗3遍。

(2)愈伤组织诱导：取灭菌后的茴茴蒜茎用无菌手术刀切成长度5～10mm的小段，接种到愈伤组织诱导培养基上，培养温度为20～30℃，每天光照0～16h，光照强度1000～30001x。

(3)愈伤组织扩大繁殖：无菌条件下，选取绿色或淡黄色无褐变、质地致密的愈伤组织，将其切成边长为3～8mm的立方体后，转接入愈伤组织增殖培养基中，培养温度为20～30℃，每天光照0～16h，光照强度1000～30001x。

2.如权利要求1所述的一种茴茴蒜组织培养方法，其特征在于步骤(1)中外植体为健康舞病害的茴茴蒜茎，外植体的清洗过程为无菌水清洗3遍，在70％乙醇中浸泡25～45s，随后放入0.1％～0.15％的HgCl₂溶液中浸泡5～15min，随后用无菌水清洗3遍。

3.如权利要求1所述的一种茴茴蒜组织培养方法，其特征在于步骤(2)中愈伤组织诱导培养基配方为：MS+6-BA0.3～1mg/L+NAA0.1～1mg/L+蔗糖20～40g/L+琼脂5～8g/L，PH值为5.6～6.0。

4.如权利要求1所述的一种茴茴蒜组织培养方法，其特征在于步骤(3)中愈伤组织增殖培养基配方为：MS+6-BA0.5～1.2mg/L+NAA0.1～1mg/L+蔗糖20～40g/L+琼脂5～8g/L，PH值为5.6～6.0。