[发明专利]一种从笋壳中提取木寡糖并分离获得木寡糖单体的方法有效
申请号: | 201410059775.6 | 申请日: | 2014-02-21 |
公开(公告)号: | CN103789376A | 公开(公告)日: | 2014-05-14 |
发明(设计)人: | 张斌;管昶;王静;王丽丽;张娜娜 | 申请(专利权)人: | 青岛博智汇力生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P19/14 | 分类号: | C12P19/14;C12P19/00;C12P19/12;C07H3/04;C07H3/06;C07H1/08 |
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地址: | 266061 山东省青岛市崂*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 笋壳中 提取 寡糖 分离 获得 单体 方法 | ||
1.一种从笋壳中提取木寡糖并分离获得木寡糖单体的方法,其特征在于,所述的方法包括以下步骤:
a)木寡糖的提取:称取笋壳加NaOH溶液浸泡后烘干至恒重,称取烘干后样品至消解罐中,加入蒸馏水后于消解炉中降解,微波功率为600-800W,消解时间为6-10min,最后用蒸馏水定容,取其上清液即为粗木聚糖溶液,然后在此粗木聚糖溶液中加入木聚糖酶,加酶量为10-60IU/g木聚糖,酶解6-10h,取上清液;
b)活性炭柱的处理:将活性碳柱用50%-70%的乙醇以2-3ml/min的流速平衡3个柱体积,再用去离子水以2-3ml/min的流速平衡3个柱体积,所述的活性炭柱Φ=3.5cm,H=45cm,内装层析用活性碳85g;
c)单体的分离:将步骤a)酶解后的木寡糖上清液上样于活性炭柱,先用去离子水以2-3ml/min的流速洗脱1-3个柱体积,再以0.1%-37%的乙醇以同一流速线性洗脱7-10个柱体积,流速为2-3ml/min,并对乙醇洗脱部分进行收集。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的活性炭是Cleanert PestiCarb NH2-石墨化碳。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的木寡糖是木二糖,步骤b)所述的乙醇体积浓度是0.1%-10%。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的木寡糖是木三糖,步骤b)所述的乙醇体积浓度是15%-25%。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的木寡糖是木四糖,步骤b)所述的乙醇体积浓度是27%-35%。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的木寡糖是木五糖,步骤b)所述的乙醇体积浓度是36%-37%。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的方法包括以下步骤:
a)木寡糖的提取:称取笋壳加NaOH溶液浸泡后烘干至恒重,称取烘干后样品至消解罐中,加入蒸馏水后于消解炉中降解,微波功率为700W,消解时间为8min,最后用蒸馏水定容,取其上清液即为粗木聚糖溶液,然后在此粗木聚糖溶液中加入木聚糖酶,加酶量为35IU/g木聚糖,酶解8h,取上清液;
b)活性炭柱的处理:将活性碳柱用60%的乙醇以2.5ml/min的流速平衡3个柱体积,再用去离子水以2.5ml/min的流速平衡3个柱体积,所述的活性炭柱Φ=3.5cm,H=45cm,内装层析用活性碳85g;
c)单体的分离:将步骤a)酶解后的木寡糖上清液上样于活性炭柱,先用去离子水以2.5ml/min的流速洗脱2个柱体积,再以0.1%-37%的乙醇以同一流速线性洗脱8个柱体积,流速为2.5ml/min,并对乙醇洗脱部分进行收集。
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