[发明专利]一种早孕多功能检测试纸的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于医学检验试剂领域，涉及一种早孕多功能检测试纸的制备方法。

背景技术

在早孕期间，怀孕天数是从上一次月经结束后的第一天开始算起，这种计算方法较为不精确；一般的早孕检测试纸是采用双抗体夹心一步法进行检测的，以胶体金为指示标记，检测尿液中HCG浓度，只能用以判断是否怀孕，而不能检测出怀孕时间及是否子宫外孕。正常情况下，受精卵会由输卵管迁移到子宫腔，然后安家落户，慢慢发育成胎儿。但是，由于种种原因，受精卵在迁移的过程中出了岔子，没有到达子宫，而是在别的地方停留下来，这就成了宫外孕，医学术语又叫异位妊娠。90%以上的宫外孕发生在输卵管。这样的受精卵不但不能发育成正常胎儿，还会像定时炸弹一样引发危险。易患人群为人工流产者，近年来，国内宫外孕的发生率增加了4～6倍，这主要与现代女性不节制地做人工流产有关。频繁地做人流，会导致子宫内创伤，胚胎不易在子宫内着床，就会转移到别的地方安家落户；患有盆腔子宫内膜异位症也可能是宫外孕的危险因素；有过宫外孕病史者；患慢性输卵管炎的妇女；输卵管发育不良或畸形的妇女；输卵管阻塞后再通的妇女也易发生异位妊娠。宫外孕是造成世界范围内母体发病率和死亡率的一个原因。近几年母体的发病率和死亡率稳步下降，但由宫外孕引起的疾病却显著增加。过去的30年中，美国的宫外孕事件从17800起上升到了109000起，占以报道怀孕总数的2%。已知的引起宫外孕的因素包括盆腔炎病史，先前的药剂流产，使用宫内节育器以及之前的消毒过程。体外受精及其他辅助怀孕方法可使这种风险显著增加（每30例中有1例）。这种增加的宫外孕事件将同样引起盆腔炎的发病率提高和影响更好的利用辅助生殖方法。化学的检测方法也需要用来确定宫外孕从而减少孕妇的死亡率、致残率，丧失生育能力的风险以及外科干预最小化。

根据报道，在第一次正常分娩中约占6-19%（或12%）发生自发流产。这些自发流产主要是因为胚胎发育中的固有缺陷，不正常的精子细胞以及着床缺陷。自发流产事件在试管受精怀孕中更加明显（22%）。自发流产的孕妇常伴有复杂的感染和败血性休克，有时导致母体的死亡。早期的确定和治疗宫外孕和其他类型的潜在不孕症是重要的。

目前，通过抽血检验、超声检测、HCG检测与超声检测结合的方法来检测怀孕天数或是检测子宫外孕，但是这些方法需要专业人员经过较长时间的检测才能得到检测结果，操作较为复杂。

发明内容

本发明的目的是为了克服以上的不足，提供一种检测方便、检测速度快、检测效率高的的早孕多功能检测试纸的制备方法。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种早孕多功能检测试纸的制备方法，早孕多功能检测试纸包括塑料基片，塑料基片上设有上样垫和吸水垫，上样垫和吸水垫上均设有保护膜，上样垫和吸水垫之间下方设有硝酸纤维素膜，上样垫的连接端设有固相化胶体金，固相化胶体金的一端与硝酸纤维素膜的一端搭接在一起，硝酸纤维素膜上依次包被有第二检测线、第一检测线和质控线；

早孕多功能检测试纸的制备方法包括以下步骤：

A、硝酸纤维素膜的制备：

a、选择3um～10um孔径的硝酸纤维素膜，根据需要将膜分切成宽度为大于等于2.0cm,长度为30.5cm的规格备；

b、用0.1MTris-Hcl缓冲液配制供第一检测线包被使用的抗人绒毛膜促性腺激素β核心片段抗体0.35mg/ml、供第二检测线包被使用的抗人绒毛膜促性腺激素α-HCG抗体1.8mg/ml及供质控线包被使用的抗鼠IgG抗体1.2mg/ml；

     c、选择硝酸纤维素膜的抗体包被面并作标记，将需包被的第一检测线、第二检测线和质控线平行均匀的包被在膜片上，且第一检测线与第二检测线距离0.4cm、第二检测线与质控线的间距控制在距离0.8cm，硝酸纤维素膜在4℃～35℃的恒温条件下干燥备用；

     d、配置封闭处理浸泡液，向配液罐加入实际生产量的纯化水；用电子分析天平称量0.1Mol缓冲液、0.5%糖份、1%封闭蛋白、0.05％防腐剂，直接加入到配液罐中搅拌，搅拌直至完全溶解，加纯化水定容至所需体积，充分搅拌均匀，搅拌时间不少于10分钟，备用；

     e、将硝酸纤维素膜用0.01Mol磷酸盐浸泡洗涤后，浸泡于封闭处理液中30min，取出晾干备用；

B、聚酯纤维条的标记及固相：