[发明专利]一种消除乳糜干扰的胶乳免疫比浊法胃蛋白酶原Ⅰ检测试剂盒

权利要求书

1.一种胶乳免疫比浊法检测血清胃蛋白酶原Ⅰ的检测试剂盒，其特征在于，包含试剂1、试剂2和校准品；

所述试剂1包括电解质、乳糜消除剂、促凝剂、稳定剂、表面活性剂、防腐剂及缓冲液；

所述试剂2包含抗人胃蛋白酶原Ⅰ抗体包被的胶乳颗粒、防腐剂及缓冲液；

所述校准品包含电解质、防腐剂、稳定剂、胃蛋白酶原Ⅰ抗原、人血清及缓冲液；

所述电解质选自无机盐； 

所述乳糜消除剂，选自脂肪酶或1～5%的聚乙二醇-硫酸菊聚糖镁试剂；

所述促凝剂选自PEG-4000、PEG-6000、PEG-8000或硫酸葡聚糖钠；

所述稳定剂选自牛血清白蛋白、酪蛋白、鱼皮明胶蛋白、山梨醇或乙二胺四乙酸二钠；

所述表面活性剂选自吐温系列、脂肪醇聚乙二醇醚、聚氧乙烯苯基醚、聚氧乙烯月桂醚系列；

所述防腐剂选自叠氮钠、苯酚、对羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸乙酯、Proclin系列；

所述缓冲液选自Tris-HCl缓冲液、甘氨酸-NaOH缓冲液、磷酸盐缓冲液、HEPES-NaOH缓冲液、MOPSO缓冲液；

所述抗人胃蛋白酶原Ⅰ抗体为单克隆抗体与多克隆抗体的混合，其中单抗/多抗的比值范围为5～10，抗体种类选自IgG 抗体或IgY 抗体；

所述的胶乳颗粒为聚苯乙烯胶乳，直径范围为150～250nm，胶乳颗粒的表面修饰有功能团，修饰的功能团选自羧基、氨基、羟基、酰肼或氯甲基；抗人胃蛋白酶原Ⅰ抗体通过化学交联法包被到胶乳颗粒表面，化学交联剂选择碳化亚胺（EDAC）、N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）、N-羟基硫代琥珀酰亚胺（Sulfo-NHS）、酰肼、异氰酸酯中的一种；交联缓冲液选自MES、MOPSO、MOPS、HEPES缓冲液，pH在6.0～8.0之间。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：所述电解质选自氯化钠、氯化钾、氯化镁或硫酸镁；

所述抗人胃蛋白酶原Ⅰ抗体选自兔抗人、山羊抗人、绵羊抗人、鼠抗人、鸡抗人、鸭抗人。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂1中，缓冲液缓冲能力为调节pH在7.0～9.0之间，浓度范围为10～100mmol/L；乳糜消除剂为脂肪酶，浓度范围5～50KU/L；电解质为氯化钠，浓度范围为1％～5％；促凝剂为PEG-6000，浓度范围为2%～6%；稳定剂为牛血清蛋白，浓度范围是0.5%～5%；表面活性剂为吐温20，浓度范围为0.1%～1.0%；防腐剂浓度范围为0.05%～0.1%。

4.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂2中，缓冲液缓冲能力为调节pH在7.0～9.0之间，浓度范围为10～100mmol/L；抗人胃蛋白酶原Ⅰ抗体为鸭抗人IgY抗体；胶乳颗粒表面修饰羧基，化学交联剂为碳化亚胺，交联缓冲液为HEPES缓冲液，其致敏的抗体胶乳颗粒浓度范围为0.5～5mg/ml；防腐剂浓度范围为0.05%～0.1%。

5.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于，所述校准品中，胃蛋白酶原Ⅰ抗原来源于自人体体液提取、纯化而得的天然胃蛋白酶原Ⅰ抗原，或自胃癌细胞株培养、纯化而得的胃蛋白酶原Ⅰ抗原，其纯度≥95％，含量为0～200ng/ml；人血清比例为5%；缓冲液的浓度范围为10～100mmol/L，pH为6.5～8.5；电解质为氯化钠，浓度范围为1%～5%；稳定剂的浓度范围为0.5～5%；防腐剂的浓度范围为0.01%～0.1%。

6.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂2中，缓冲液缓冲能力为调节pH在7.0～9.0之间，浓度范围为10～100mmol/L；抗人胃蛋白酶原Ⅰ抗体为鸭抗人IgY抗体；胶乳颗粒表面修饰羧基，化学交联剂为碳化亚胺，交联缓冲液为HEPES缓冲液，其致敏的抗体胶乳颗粒浓度范围为0.5～5mg/ml；防腐剂浓度范围为0.05%～0.1%。

7.根据权利要求6所述的试剂盒，其特征在于所述校准品中，胃蛋白酶原Ⅰ抗原来源于自人体体液提取、纯化而得的天然胃蛋白酶原Ⅰ抗原，或自胃癌细胞株培养、纯化而得的胃蛋白酶原Ⅰ抗原，其纯度≥95％，含量为0～200ng/ml；人血清比例为5%；缓冲液的浓度范围为10～100mmol/L，pH为6.5～8.5；电解质为氯化钠，浓度范围为1%～5%；稳定剂的浓度范围为0.5～5%；防腐剂的浓度范围为0.01%～0.1%。