[发明专利]一种覆盖野生稻全基因组杂合片段导入系的构建方法

权利要求书

1.一种覆盖野生稻全基因组杂合片段导入系的构建方法，其特征在于：其主要包括亲本选择、杂交、回交、目标标记检测、自交、目标标记检测；具体步骤如下：

（1）亲本选择：供体亲本为野生稻，受体亲本要求与野生稻遗传背景有明显差异；

（2）亲本杂交：受体亲本为母本，供体亲本为父本，杂交单株一般随机3-5株；

（3）回交：从F₁代开始，随机选择20-25株与受体亲本回交，得到BC₁F₁；每个株系随机选择3株与受体亲本回交，得到55-65个BC₂F₁株系；每个株系随机选择3株与受体亲本回交，得到170-190个的BC₃F₁株系；每个株系随机选择3株与受体亲本回交，最终得到530-550个BC₄F₁株系；其次，再遇到缺失的杂合片段时，是在BC₂F₁代保留部分株系，后期仅用缺失目标标记进行筛选，将含有缺失目标基因的单株再进行回交；

（4）目标标记检测：先用23-25对多态性较好的引物，平均每条染色体2对引物，分别分布在染色体的长臂和短臂上，对所有个体进行分析，筛选含有1个或1个以下杂合片段的单株，然后对保留的单株进行全基因组基因型分析；

（5）自交：对单株进行全基因组基因型分析后，选取有2个以下杂合片段的单株自交，并进行套袋，然后收种；

（6）目标标记检测：入选单株种植，含有1个杂合片段每个株系种植50-300株，含有2个杂合片段的每个株系种植100-400株；

（7）杂合片段导入系单株筛选：用目标标记对种植株系单株进行检测分析，选择含有目标标记杂合单株；同时含有目标标记纯合单株也进行保留。

2.根据权利要求1所述的一种覆盖野生稻全基因组杂合片段导入系的构建方法，其特征在于：所述的受体亲本为籼稻或粳稻。

3.根据权利要求1所述的一种覆盖野生稻全基因组杂合片段导入系的构建方法，其特征在于：所述步骤（6）中的入选单株均为BC₃F₂或BC₄F₂代的种子；步骤（7）中的杂合单株均为BC₃F₃或BC₄F₃代的种子。