[发明专利]使用硫酯酶变异体的脂质的制造方法有效

专利信息
申请号: 201380049117.2 申请日: 2013-08-22
公开(公告)号: CN104662154B 公开(公告)日: 2017-09-01
发明(设计)人: 川原彰人 申请(专利权)人: 花王株式会社
主分类号: C12N15/09 分类号: C12N15/09;C12N1/13;C12N1/21;C12N5/10;C12N9/18;C12P7/64
代理公司: 北京尚诚知识产权代理有限公司11322 代理人: 龙淳
地址: 日本*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 使用 硫酯酶变 异体 制造 方法
【权利要求书】:

1.一种脂质的制造方法,其中,

包括:在宿主中导入编码下述(c)的蛋白质的基因从而得到转化子的工序;和从得到的转化子中采取脂质的工序,

(c)由序列号1所示的氨基酸序列中第209号的氨基酸由色氨酸置换为苏氨酸、谷氨酸或者丙氨酸的氨基酸序列构成,并且具有硫酯酶活性的蛋白质。

2.如权利要求1所述的脂质的制造方法,其中,

所述(c)的蛋白质由序列号3、5或者7所示的氨基酸序列构成。

3.如权利要求1所述的脂质的制造方法,其中,

编码所述蛋白质的基因为下述(e)~(h)的任一种的基因,

(e)具有序列号2的第334号至第1245号的碱基序列、且相当于序列号2的第625号~第627号的碱基由编码色氨酸的碱基置换为编码苏氨酸、谷氨酸或者丙氨酸的碱基的碱基序列,并且编码具有硫酯酶活性的蛋白质的基因;

(f)具有(e)的基因的碱基序列中相当于序列号2的第625号~第627号的碱基以外的1~10个碱基缺失、置换、插入或者附加后的碱基序列,并且编码具有硫酯酶活性的蛋白质的基因;

(g)由序列号2所示的碱基序列中编码第625号~第627号的色氨酸的碱基被置换为编码苏氨酸、谷氨酸或者丙氨酸的碱基的碱基序列构成,并且编码具有硫酯酶活性的蛋白质的基因;

(h)由(g)的基因的碱基序列中第625号~第627号以外的1~10个碱基缺失、置换、插入或者附加后的碱基序列构成,并且编码具有硫酯酶活性的蛋白质的基因。

4.如权利要求3所述的脂质的制造方法,其中,

所述(g)的基因由序列号4、6或者8所示的碱基序列构成。

5.如权利要求1~4中任一项所述的脂质的制造方法,其中,

所述宿主选自植物、藻类以及微生物。

6.如权利要求1~4中任一项所述的脂质的制造方法,其中,

所述宿主选自拟南芥、蓝藻以及大肠杆菌。

7.如权利要求1~4中任一项所述的脂质的制造方法,其中,

所述脂质包含月桂酸。

8.如权利要求1~4中任一项所述的脂质的制造方法,其中,

在所述脂质中含有27质量%以上的月桂酸。

9.如权利要求1~4中任一项所述的脂质的制造方法,其中,

在所述脂质中含有65质量%以上的碳原子数为12~16的脂肪酸。

10.如权利要求1~4中任一项所述的脂质的制造方法,其中,

所述宿主为微生物。

11.如权利要求1~4中任一项所述的脂质的制造方法,其中,

所述宿主为大肠杆菌。

12.一种提高脂质的生产性的方法,其中,

包括在宿主中导入编码下述(c)的蛋白质的基因,从而得到转化子的工序,

(c)由序列号1所示的氨基酸序列中第209号的氨基酸由色氨酸置换为苏氨酸、谷氨酸或者丙氨酸的氨基酸序列构成,并且具有硫酯酶活性的蛋白质。

13.一种转化子,其中,

所述转化子为在宿主中导入编码下述(c)的蛋白质的基因而得到的,

(c)由序列号1所示的氨基酸序列中第209号的氨基酸由色氨酸置换为苏氨酸、谷氨酸或者丙氨酸的氨基酸序列构成,并且具有硫酯酶活性的蛋白质;

所述宿主为藻类或者微生物。

14.如权利要求13所述的转化子,其中,

所述(c)的蛋白质由序列号3、5或者7所示的氨基酸序列构成。

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