[发明专利]神经细胞网络的形成及其利用、以及神经细胞播种器件有效
| 申请号: | 201380048253.X | 申请日: | 2013-03-21 |
| 公开(公告)号: | CN104640971B | 公开(公告)日: | 2017-03-15 |
| 发明(设计)人: | 宇理须恒雄;王志宏;宇野秀隆;西藤美穗;长冈靖崇 | 申请(专利权)人: | 国立研究开发法人科学技术振兴机构 |
| 主分类号: | C12M3/00 | 分类号: | C12M3/00;C12M1/34;C12N5/0793 |
| 代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司11021 | 代理人: | 葛凡 |
| 地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 神经细胞 网络 形成 及其 利用 以及 播种 器件 | ||
1.一种神经细胞网络形成用培养装置,其特征在于,所述装置在能够填充细胞培养基的平坦基板上形成由复数个突起部包围成的细胞定着部,该细胞定着部具有下述(1)~(3)的条件,
(1)在构成细胞定着部的复数个突起部之间设定有宽的间隔,其宽度在使神经细胞的细胞体无法通过的限度内,
(2)由复数个突起部规定的细胞定着部的内径为能够收纳1~数个神经细胞的细胞体的尺寸,
(3)构成细胞定着部的底面的基板面具有以下的(i)及(ii)中的至少一个要素,
(i)包覆有细胞外基质形成物质,
(ii)设置有微细贯通孔,所述微细贯通孔为利用设置在所述基板面的下部的抽吸装置抽吸培养基用的微细贯通孔,具有使神经细胞无法通过的孔径。
2.根据权利要求1所述的神经细胞网络形成用培养装置,其特征在于,所述培养装置相当于以下(1)~(3)中的任一者,
(1)在所述基板上形成作为选择区域的细胞定着部,在该细胞定着部配置1~数个作为选择细胞的神经细胞,并且,其它神经细胞仅仅播种在基板上,
(2)在所述基板上以适当的相互间隔形成复数个细胞定着部,在这些细胞定着部配置1~数个神经细胞,并且,其中的1个细胞定着部被用作配置有神经细胞的选择区域,
(3)按照能够在所述基板上形成复数个或多个相当于上述(1)或(2)的神经细胞网络的单元的方式,在适当位置分散地形成有上述细胞定着部的神经细胞网络的高通量解析用培养装置。
3.根据权利要求1或根据权利要求2所述的神经细胞网络形成用培养装置,其特征在于,所述神经细胞网络形成用培养装置是以神经细胞网络为对象的平面膜片钳装置,
(1)所述基板为电绝缘性基板,设置有所述微细贯通孔,所述微细贯通孔使该电绝缘性基板的构成细胞定着部的底面的基板面的两侧的表面连通,(2)在微细贯通孔的第一表面侧、即神经细胞网络形成侧和其相反侧、即第二表面侧分别设置有用于保持作为所述细胞培养基的导电性液体的储液部、和按照能够对该储液部的导电性液体通电的方式配置的电极部,(3)第一表面侧的储液部成为定着在所述细胞定着部的神经细胞用的储液部。
4.根据权利要求3所述的神经细胞网络形成用培养装置,其特征在于,所述平面膜片钳装置中,所述第一表面侧及第二表面侧的电极部具有以下的(a)~(c)的要素,
(a)电极容器,所述电极容器的、在所述储液部导入有导电性液体时与该导电性液体接触的容器壁的至少一部分由无机多孔材料构成,
(b)收纳在上述电极容器内的、在贵金属Nm的表层部形成有该贵金属的氯化物NmCl层的电极,
(c)填充在上述电极容器内的、以饱和浓度溶解有所述贵金属的氯化物NmCl及碱金属氯化物的电极溶液。
5.根据权利要求1~权利要求4中任一项所述的神经细胞网络形成用培养装置,其特征在于,所述神经细胞网络形成用培养装置用于以下(A)~(C)中的任一种目的,
(A)在神经细胞网络中的神经细胞离子通道电流的计测·解析中使用,
(B)在至少包含Ca成像解析、基于作为突触前部位的标记物的突触泡蛋白或突触蛋白的标记的成像解析、基于作为树突的标记物的MAP2的标记的成像解析及基于对内体、外来体进行标记的FM1-43或FM4-64的成像解析的成像解析中使用,
(C)在神经细胞网络的高通量筛选系统中使用。
6.根据权利要求5所述的神经细胞网络形成用培养装置,其特征在于,所述神经细胞网络形成用培养装置用于(B)所述的成像解析时,还具有下述(D)~(F)中的1个以上要素,
(D)在所述基板的上部设置有接受神经细胞所发出的光的受光装置,
(E)在所述基板的上部设置有对神经细胞或基板表面照射光的照射装置,
(F)上述(E)的照射装置装备有用于仅对规定的单个神经细胞照射光的聚光系统。
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