[发明专利]基于免疫测定法的溶液中结合动力学的测定

说明书

本文报道了基于免疫测定法的缓冲液或血清/血浆样品中的溶液中结合动力学的测定。

背景技术

全身起作用的药物的药理作用不仅是药物内在活性的函数，而且也是其在人体中吸收，分布，代谢和排泄的函数。这些特征组合构成术语“药代动力学”。药代动力学通常指在有生命的生物体内对与药物和/或其代谢物的吸收、分布、代谢和排泄的动态过程相关的时间进程(即，动力学)的研究，并与生物制药学，药理学和治疗学领域密切相关。

因为身体延迟药物分子的跨膜运输，将其稀释至分布的多个区间，将其转换为代谢物，并最终排泄药物分子，所以通常很难预测药物在体内的药理作用。但是，研究人员通常使用药代动力学研究作为一种方法来预测药物在体内作用位点的效力。

传统上，参与临床前吸收，分布，代谢和排泄研究的研究人员使用药代动力学/数学模型并结合来自血液(或血清或血浆)和/或尿液的实际药物浓度数据，以及来自多种组织的浓度数据，以表征在有生命的生物体内药物的行为和方式。

在手边具有药代动力学信息可以看出：(1)药物是否吸收不良，产生亚治疗的循环水平，或(2)是否药物经历前全身代谢(Pre-systemic metabolism)为非活性代谢物。这些信息也可以提供用于随后的决策的指导，如(1)是否通过改变盐形式或制剂，以改善药物的吸收，(2)是否调查制备前药的可能性，或(3)是否考虑不同的给药途径。

除了上述之外，药代动力学/数学模型一般也被认为是有用的，尤其是：(1)预测使用任何剂量方案的血浆，组织和尿的药物水平；(2)计算对于个体患者的最佳剂量方案；(3)估计药物和/或代谢物可能的积累；(4)关联药物浓度与药理和毒理活性(即药效学)；(5)评估制剂之间可利用度的速率和程度的差异(即生物等效性)；(6)描述生理或疾病的变化如何影响药物的吸收，分布和/或消除；(7)解释药物-药物和食物-药物的相互作用。

药代动力学的吸收，分布，代谢和排泄数据也成为有前景的新候选药物的药理学表征过程的组成部分。

因此，药物开发过程中重要的组成部分是药物的药代动力学(PK)和毒代动力学(TK)的表征和对药代动力学和药效学(PD)效果之间关系(PK/PD)的理解的建立。PK/TK评估的前提是可靠的生物分析方法的可利用性。小分子药物通常使用基于液相色谱-质谱(LC-MS)的方法定量，而相比之下，对治疗性蛋白的生物分析金标准技术是配体结合测定法(LBA)。除了高灵敏度和高通量的能力，LBA的主要优点是，能够分析总药物浓度，或者仅具体地分析具有配体结合能力的药物分子(“游离药物”)。

为了给出合理的数据解释，对用于药物定量的生物分析测定法的能力和局限性的清晰理解是必不可少的。确定游离药物浓度的先决条件是利用LBA，其通过使用例如，靶标捕获测定法能够在复合物基质中分析具有配体结合能力的药物分子。然而，仅使用选择的适当的测定法模式不一定足以准确测定游离药物浓度。药物和靶标以受质量作用定律支配的可逆的非共价方式相互作用。此外，LBA均等地基于药物/分析物和测定试剂之间可逆的非共价相互作用。因此，测定结果很容易由结合伙伴的平衡中的任何干扰混淆。此类测定干扰已在目前的文献提出，但没有详细讨论，(见例如Lee,J.W.,等人,AAPS.J.13(2011)99-110,Kuang,B.,等人,Bioanal.2(2010)1125-1140)。

用于治疗性蛋白生物分析的标准技术是配体结合测定法(LBA)。LBA的主要优点是能够区分总药物浓度和具有靶标结合能力的药物浓度。然而，仅仅是选择的适当的测定法模式不一定足以准确测定游离药物浓度。药物，靶标和测定试剂以受质量作用定律支配的可逆的非共价方式相互作用。因此，测定结果很容易由结合伙伴的平衡中的任何干扰混淆。然而，清楚地了解测定法的可能性和局限性，对于给出合理的数据解释是必要的(见例如Staack,G.,等人,Bioanalysis 4(2012)381-395)。