[发明专利]基于胚泡发育的胚胎质量评估

说明书

技术领域

本发明涉及一种基于观察到的细胞动力学和细胞形态学、尤其是在从致密化起始到胚泡形成的后期阶段中的胚胎发育来选择用于体外受精的胚胎的方法和系统。

背景技术

不孕症影响全球超过8千万人。据估计，所有夫妇中有10％经历原发性或继发性不孕症。体外受精(IVF)是一种可选择的医学治疗，其可以为原本不能怀孕的夫妇提供受孕的机会。它是将卵子(卵母细胞)从女性卵巢中取出然后在实验室中用精子使其受精的过程。然后将这个过程中产生的胚胎放入子宫中以进行可能的着床。为了避免多胎妊娠和多胞胎，只移植几个胚胎(通常少于4个并且理想地只有1个)。选择用于移植的适当胚胎是任何IVF治疗中的关键步骤。当前的选择程序大部分完全基于使用标准立体显微镜对胚胎在发育期间的不同时间点的形态学评价，尤其是在移植时的评价。然而，人们普遍认识到，该评价程序需要定性以及定量方面的改进。

一种方法是使用“早期卵裂”至2细胞期(即在授精/注射后25-27小时之前)作为质量指标。在这种方法中，在受精后25-27小时对胚胎进行目视检查以确定第一次细胞卵裂是否已经完成。然而，虽然早期卵裂以及其它早期标准可能是关于发育成胚胎的质量指标，但是仍然需要关于着床成功并且从而因此成功怀孕的质量指标。

在此申请中或在本申请中引用的所有专利和非专利参考文献也以全文引用的方式并入本文中。

发明内容

最近的研究(Wong等人(2010))集中于胚胎基因组活化(EGA)之前的胚胎发育，指示了人类胚胎发育的成功和失败主要是在EGA之前确定的，从而证明在受精后第2天的早期着床是正确的。本申请人在2012年5月31日提交的未决申请PCT/DK2012/05018(“Embryo quality assessment based on blastomere cleavage and morphology”)监测了其中发生胚胎基因组活化的后续卵裂的发生时间(timing)和持续时间，并且产生了另外的胚胎质量标准。然而，本发明人已经发现，监测胚胎一直到胚泡期(在此期间胚胎基因组活化已经完全占主导地位(take over))，可以产生一系列的胚泡质量标准，所述胚泡质量标准在选择已转化为胚泡的胚胎以增加着床成功性方面非常有用。传统上已经基于滋养外胚层中或内细胞团中的细胞数目评价了胚泡，但是这些胚泡参数难以定量。因此，本发明的目的是研发更容易定量的新颖胚泡质量标准，以评价胚泡期的胚胎质量。

因此，本发明涉及一种有助于在胚胎转化成胚泡后基于胚胎发育期间选取的形态学和/或动力学参数来选择待移植用于着床的最佳体外受精胚胎的方法和系统。

在第一方面，本发明涉及一种用于确定胚胎质量的方法，其包括将所述胚胎监测一段时间，所述一段时间包括胚胎从受精或初始致密化转化成胚泡，即胚泡期中的一个；和测定所述胚胎的一个或多个胚泡质量标准；以及基于所述一个或多个胚泡质量标准来确定胚胎质量。具体来说，可将本发明应用于人类胚胎，并且获得的胚胎质量量度可用于鉴别和选择适合移植到女性子宫中以便提供妊娠和活产婴儿的胚胎。

胚泡质量标准可以有利地与例如在WO 2007/144001中和在2012年5月31日提交的名称为“Embryo quality assessment based on blastomere cleavage and morphology”的未决PCT申请PCT/DK2012/05018中列出的早期胚胎质量参数组合，并且因此与胚胎质量和胚胎存活力的其它信息组合。这些申请因此也以全文引用的方式并入本文中。

定义和胚胎质量参数

卵裂时间被定义为观察到新形成的卵裂球被融合的细胞膜完全分开的第一时间点。因此，卵裂时间是卵裂球卵裂完成的时间。在本上下文中，所述时间被表示为ICSI显微注射后的小时数或在IVF中混合精液和卵母细胞后的小时数，即授精时间。这是将精子专门引入到卵子中的时间。然而，在本文中，还使用了术语受精来描述这个时间点。因此，卵裂时间如下：

·t2：卵裂成2卵裂球胚胎的时间

·t3：卵裂成3卵裂球胚胎的时间

·t4：卵裂成4卵裂球胚胎的时间

·t5：卵裂成5卵裂球胚胎的时间

·t6：卵裂成6卵裂球胚胎的时间

·t7：卵裂成7卵裂球胚胎的时间

·t8：卵裂成8卵裂球胚胎的时间

细胞周期的持续时间定义如下：

·cc1＝t2：第一个细胞周期。

·cc2＝t3-t2：第二个细胞周期，即作为2卵裂球胚胎的时间段的持续时间。