[发明专利]GH61多肽变体以及编码其的多核苷酸有效
申请号: | 201380021502.6 | 申请日: | 2013-04-26 |
公开(公告)号: | CN104245926B | 公开(公告)日: | 2021-05-07 |
发明(设计)人: | J.林;D.博安;M.马兰塔;L.贝雷斯福德;M.拉姆萨;M.斯威尼;M.沃顾里斯;E.兹纳梅罗斯基;F.W.拉斯马森 | 申请(专利权)人: | 诺维信股份有限公司;诺维信公司 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N9/42;C12N15/53;C12N15/56;C12N5/10;A01H5/00;C12P19/14;C12P19/02;D21C5/00;C11D3/386 |
代理公司: | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人: | 陈文平 |
地址: | 美国加利*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | gh61 多肽 变体 以及 编码 多核苷酸 | ||
1.一种GH61多肽变体,其在与SEQ ID NO:30的位置138相对应的位置处具有Q138C,G,K,L,或M取代,其中该变体具有纤维素分解增强活性,并且其中该变体与亲本GH61多肽的成熟多肽的氨基酸序列具有至少97%、但少于100%的序列一致性;该变体相对于SEQ ID NO:30所示亲本多肽的成熟多肽具有增加的热稳定性。
2.如权利要求1所述的变体,该变体进一步包含在与SEQ ID NO:30的位置111、152、155、以及162相对应的位置处1,2,3或4个取代,其中该变体具有纤维素分解增强活性;其中在对应于位置111的取代为Val;在对应于位置152的取代为Ser;在对应于位置155的取代为Leu;在对应于位置162的取代为Trp。
3.如权利要求1所述的变体,该变体进一步包含在与SEQ ID NO:30的位置96、98、200、202、以及204相对应的位置处1,2,3,4或5个取代,其中该变体具有纤维素分解增强活性;其中在对应于位置96的取代为Val;对应于位置98的取代为Leu;对应于位置200的取代为Ile;对应于位置202的取代为Leu;对应于位置204的取代为Val。
4.如权利要求1所述的变体,该变体进一步包含在与SEQ ID NO:30的位置105、154、188、189、216、以及229相对应的位置处1,2,3,4,5或6个的取代,其中该变体具有纤维素分解增强活性;其中在对应于位置105的取代为Pro或Lys;在对应于位置154的取代为Leu;在对应于位置188的取代为Ala或Trp;在对应于位置189的取代为Lys;在对应于位置216的取代为Leu或Tyr;在对应于位置229的取代为Trp,His,lie或Tyr。
5.如权利要求1所述的变体,该变体在62℃处理下具有与该亲本相比1.02至1.3倍的增加的热稳定性。
6.如权利要求1所述的变体,该变体在65℃处理下具有与该亲本相比1.06至1.7倍的增加的热稳定性。
7.如权利要求1所述的变体,该变体在68℃处理下具有与该亲本相比1.3至3.8倍的增加的热稳定性。
8.一种分离的多核苷酸,其编码如权利要求1-7中任一项所述的变体。
9.一种核酸构建体,其包含如权利要求8所述的多核苷酸。
10.一种表达载体,其包含如权利要求8所述的多核苷酸。
11.一种转化了权利要求8所述多核苷酸的重组细菌或真菌宿主细胞。
12.一种产生GH61多肽变体的方法,包括:在适于该变体表达的条件下培养如权利要求11所述的重组宿主细胞。
13.如权利要求12所述的方法,进一步包括回收该变体。
14.一种产生如权利要求1-7中任一项所述的变体的方法,包括:在有助于该变体产生的条件下培养包含编码该变体的多核苷酸的转基因植物或植物细胞。
15.如权利要求14所述的方法,进一步包括回收该变体。
16.一种用于降解或转化纤维素材料的方法,包括:用含有如权利要求1-7中任一项所述的具有纤维素分解增强活性的GH61多肽变体的酶组合物处理该纤维素材料。
17.如权利要求16所述的方法,其中该纤维素材料经过了预处理。
18.如权利要求16或17所述的方法,进一步包括回收该降解的或转化的纤维素材料。
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