[发明专利]A型流感病毒的检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于检测A型流感病毒的利用免疫层析法的检测试剂盒，其使用了与A型流感病毒核蛋白有特异性抗原抗体反应，但是与由SDS(十二烷基硫酸钠)-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离出的全长的A型流感病毒核蛋白在Western Blot法中没有抗原抗体反应的抗体。

背景技术

流感为流感病毒导致的感染症，作为其典型的症状，已知有突然出现发烧·头痛·全身倦怠感·肌肉关节痛等，随之而来并持续有咳嗽·鼻涕等，一般认为这些症状在约1周后减轻。与其它的所谓的感冒综合征相比，流感的特征在于全身症状强，而为了进行正确的诊断需要病毒学上的根据。在流感流行的时期，对具有感冒症状的患者进行是否为流感的正确诊断，不仅与用于治疗的抗流感病毒剂的适当选择有紧密联系，而且从准确地把握流行状况和判定流感疫苗的效果这样的免疫学观点考虑也很重要。

为了正确地进行流感的病原诊断，标准方法为以咽拭子液和漱口液为材料分离病毒，但直至诊断需要长的时间。若使用PCR(Polymerase chain reaction)法检测病毒基因组，则虽然可以在短时间得到精确度高的结果，但PCR法需要特别的装置，若不是卫生研究所和特定的检查室的话则无法进行。

近年来，开始市售可在床边或门诊等检测流感抗原的迅速诊断试剂盒，可在日常的临床中容易地进行病毒学诊断。应用了免疫层析法原理的流感的迅速诊断试剂盒(参照专利文献1～11)使用可容易采集的鼻腔粘膜或咽部粘膜等生物样品，能够以简便的操作在短时间内得到检查结果，因此，具有接受检查的患者和实施检查的医疗工作者两者的负担都轻这样的优点。另外，在得到“阳性”的结果的情况下，可以提供用于医生做出正确诊断的有益的信息。然而，目前市售的迅速诊断试剂盒的流感病毒的检测灵敏度不足，即使得到“阴性”的结果也未必能否定病毒的感染。

已知的是，由流感患者的鼻腔粘膜或咽部粘膜检测的流感病毒的量，在发病后2～3天达到最高，然后迅速地减少，并在5～7天消失。为了用迅速诊断试剂盒判定为“阳性”，需要感染后流感病毒在生物体内增殖，使生物样品中的病毒量达到检测灵敏度以上。在病毒的增殖开始后不久的感染初期的患者和通过接种疫苗抑制了病毒的增殖速度的患者等中，有时生物样品中不存在判定为阳性所需充分的量的病毒，实际上尽管感染了流感病毒，但是迅速诊断试剂盒的结果为“阴性”，有假阴性判定的问题。在临床现场，利用迅速诊断试剂盒进行检查，若发病后经过24小时，则可稳定地检测病毒而得到精度高的结果，但是在发病后12小时以内，有时无法检测到病毒而无法正确地判定，从这样的实际情况考虑，对于是“阴性”结果的患者，根据其它的发现，在次日以后实施再检查，患者必须再次到医疗机构就诊，承受在时间和费用方面的过度的负担。

进而，从用于治疗的抗流感病毒剂的选择的观点考虑，也要求在感染尽量早的时期正确地诊断流感。目前，作为流感治疗药的代表性药物，广泛使用磷酸奥司他韦(商品名达菲)及扎那米韦(商品名瑞乐砂)等神经氨酸酶抑制剂。神经氨酸酶在流感病毒在体内从细胞到细胞的感染·传播时承担重要的作用，神经氨酸酶抑制剂通过抑制神经氨酸酶的活性来抑制在细胞内增殖的流感病毒流出细胞外，抑制病毒在细胞间的传播，从而发挥治疗效果。据认为如上所述的由神经氨酸酶抑制剂构成的抗流感病毒剂在发病后尽量早的时期服用是有效的。一般认为流感发病后12小时以内服用是理想的，在24小时以内服用能得到充分的有效性，但是发病后若超过48小时，则治疗效果不足。但是，要求从早期开始利用抗流感病毒剂进行治疗，另一方面，已知神经氨酸酶抑制剂也有副作用，另外，也存在着应该恰当地使用抗流感病毒剂以备流感的爆发性流行这样的社会需求等方面的考虑，因此要求在正确诊断流感病毒感染下开出抗流感病毒剂的处方。因此，强烈要求临床现场中广泛使用的流感迅速诊断试剂盒具有进一步提高流感病毒的检测灵敏度，从发病的尽量早的时期，特别是即使在发病后24小时以内，也可稳定且高精度地得到“阳性”的判定这样的性能。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开2011-069800号公报

专利文献2：日本特开2010-261912号公报

专利文献3：日本特开2007-093292号公报

专利文献4：日本特开2007-033293号公报

专利文献5：日本特开2006-194688号公报

专利文献6：日本特开2006-194687号公报

专利文献7：日本特开2006-189317号公报