[发明专利]防止血小板活化的装置和方法

说明书

技术领域

本发明主要涉及抑制血小板活化和继发的血栓形成事件。在具体的实施方式中，本发明涉及保护生物材料以免形成血栓的方法。

技术背景

使用生物材料，例如心血管装置，意味着将外源性表面引入受试者的循环系统。血栓形成往往是与医学装置相关的并发症，从而当体内的移植装置与血液接触时，形成血栓或血凝块。血细胞和生物材料之间的相互作用能够触发复杂的一连串事件，包括血小板活化和粘附。

在医学领域，由生物医学装置诱导的血栓形成应答仍然是严重的问题。特别是，心血管装置带来血栓形成并发症的严重风险，并已知会导致多种类型的有潜在致命后果的并发症，例如动脉支架、导管和人工瓣膜的阻塞，以及心肺分流术和血管形成术过程中的并发症。尽管使用抗血小板治疗，伴随心血管装置的血栓并发症还是能发生。改进心血管装置的血液相容性成果有限，且对抑制生物材料相关的血栓形成的方法有显著的未满足的医学需要。

发明概述

本发明提供了靶向信号调节蛋白α(SIRP-α)以抑制血小板结合和活化的方法，其总体目标是抑制血小板介导的血栓形成事件而不系统地损害血小板的功能。

本发明的一个实施方式提供抑制生物材料相关的血栓形成事件的方法，其包括通过将CD47或其Ig结构域附着于所述生物材料的表面，减少与所述生物材料结合的血小板数量，和/或抑制血小板活化。例如，本发明的方法抑制生物材料上或其附近的血栓形成，所述生物材料位于移植物、医学装置、管道或治疗递送工具的表面上。

本发明的另一个实施方式提供一种生物材料，该生物材料包含以减少与生物材料结合的血小板数量和抑制血小板活化的有效量附着于生物材料表面的CD47或其Ig结构域。本发明还提供抑制生物材料相关的血栓形成事件的试剂盒，其包含CD47或其Ig结构域。

附图说明

图1A：使用抗人SIRP-α抗体(SE7C2)，由流式细胞术显示的人血小板中的SIRP-α表达。

图1B：代表性的人SIRP-α的免疫染色确定血小板中的SIRP-α表达。

图2A：通过Chandler环装置，从在暴露于CD47修饰的和对照的PVC管3小时后采样的全血来评估，由于暴露于CD47，血小板附着显著降低。

图2B：从暴露于CD47修饰的和对照的PVC管3小时后采样的全血来评估非附着的血小板活化，使用流式细胞术检测血小板活化的表面标志物CD62P(*表示与PCV比较P＜0.01)

发明详述

信号调节蛋白α(SIRP-α)是在骨髓来源细胞，例如来源于巨噬细胞的单核细胞，中表达的跨膜蛋白。SIRP-α信号传导由定位于胞质尾区的酪氨酸抑制基序(ITIMs)介导。SIRP ITIMs激活含有Src同源结构域2的磷酸酶1(SHP-1)和2(SHP-2)。SIRP-α也可以称为CD172A、SHPSI、P84、MYD-I、BIT、PTPNSI或SIRP-Iα。

惊人地，申请人发现SIRP-α表达于血小板的表面。之前没有在血小板背景下研究SIRP-α，也没有记录SIRP-α在血小板中表达。因此，靶向SIRP-α是抑制血小板结合和活化的新策略，其总体目标是抑制血小板介导的血栓形成事件而不系统地损害血小板的功能。本发明的实施方式提供抑制生物材料相关的血小板介导的血栓形成事件的新方法。总的来说，该方法包括通过将CD47或其Ig结构域附着于生物材料的表面，抑制血小板的附着和/或活化。CD47固定化的表面在防止血小板细胞附着和活化方面具有显著的治疗潜力。

CD47，也称为整合素相关蛋白，是广泛表达的跨膜蛋白。它是膜蛋白免疫球蛋白超家族的成员，在N末端具有单个、可变Ig结构域。已经将CD47的Ig结构域鉴定为SIRP-α的配体(Brown，EJ等(2001)Trends Cell Biol11：130-5；Vernon-Wilson，EF等(2000)Eur.J.Immunol.30：2130-7；Takizawa，H等(2007)Nat.Immunol 8：1287-9；和Subramanian，S等(2006)Blood107：2548-56)。如下文更详细地描述，申请人证明了生物材料表面上SIRP-α和CD47之间的相互作用，能够通过减少粘附于所述生物材料的血小板数量和减少血小板活化，赋予生物材料血栓抵抗性。