[实用新型]用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的免疫检测试剂盒

说明书

技术领域

本实用新型涉及抗体检测试剂盒技术领域，特别涉及抗人乳头瘤病毒（Human Papillomavirus，HPV）抗体检测试剂盒技术领域，具体是指一种用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的免疫检测试剂盒，尤其可用于国内流行的高危险型人乳头瘤病毒（HPV）亚型HPV16和HPV18。

背景技术

子宫颈癌是第二位常见女性恶性肿瘤，人乳状瘤病毒（HPV）是其发生的必要条件。尽管人群HPV感染很普遍，如：宫颈癌高发区妇女35岁以后感染率仍高达20.8%。但超过80%的HPV DNA阳性妇女不会进展为癌症或癌前病变。因此HPV DNA检测缺陷是无法分辨一过性感染和可引起宫颈病变的感染，导致较高假阳性率。大量研究显示，HPV致癌基因表达产物（癌蛋白oncoprotein）有很高的致癌活性，因此这些生物标志物有可以作为比HPV DNA更为准确有特异性的宫颈癌预测指标。高危HPV E2、E6、E7癌蛋白(oncoprotein)的表达水平和宫颈癌前病变不同阶段直接相关。利用这一特性可以构建全新的宫颈癌分子筛查指标。

对HPV致癌机理的研究表明，高危型HPV的早期表达蛋白E6，E7蛋白在宫颈癌的发生中起着重要作用。在宫颈高度病变和癌症患者的宫颈上皮细胞中HPV E6及E7蛋白一般呈过度表达，持续表达和过量表达的E6，E7致癌蛋白可与宿主细胞调控蛋白（如，P53和Rb蛋白等）相互作用，使肿瘤抑制因子失活，导致细胞永生化和恶性转化。

除了HPV DNA检测和HPV致癌蛋白检测，血液（体液）中HPV抗体也证明对HPV感染及宫颈癌发病史有很大的相关性。HPV L1血液抗体可用标准ELISA方法检测,提供HPV感染信息。随着HPV感染时间的延长，HPV诱导产生了抗HPV抗体，故可检测到血清中抗HPV抗体。Wikstrom等检测了47例男性现症尖锐湿疣患者和32例曾有尖锐湿疣病史患者的男性对HPV6型和HPV11型衣壳蛋白的血清IgG抗体，并与205例无生殖器尖锐湿疣病史的男性比较，结果，血清中抗HPV6型的IgG抗体在曾有尖锐湿疣病史的男性中为35%，在现症尖锐湿疣中为27%，而在对照组为10%。这表明抗HPV6IgG抗体的出现发生在尖锐湿疣病期的晚些时候，同时IgG阳性也反映曾感染过这种病毒。

Stone等报道了利用此方法对于美国普通人群7218例HPV-16的感染率研究，结果表明女性阳性率17.9%，男性阳性率7.9%（Stone，K.M.,et al.,Seroprevalence of Human Papillomavirus Type16Infection in the United States.2002.The Journal of Infectious Diseases2002;186:1396-402）。HPV L1抗体ELISA方法在配合HPV疫苗（Merck公司Gardasil预防性疫苗）的研发及临床试验过程中曾被广泛采用。Luevano等用蛋白芯片例宫颈癌病人的血清样品进行了高通量检测分析（Luevano,M.,et al.,High-Throughput Profiling of the Humoral Immune Responses Against Thirteen Human Papillomavirus Types by Proteome Microarrays.2010.Virology.2010;405(1):31–40），分析13个HPV型的总共54604种蛋白的抗体profiling，结果表明了血液中致癌蛋白的抗体与宫颈癌、高度病变、低度病变、及无症状普通人有较强的相关性（Luevano,M.,et al.,High-Throughput Profiling of the Humoral Immune Responses Against Thirteen Human Papillomavirus Types by Proteome Microarrays.2010.Virology.2010;405(1):31–40）。

因此，为了实现HPV抗体检测的高灵敏度、高特异性和高稳定性，需要提供新的用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的抗原。

实用新型内容

为了解决上述存在的问题，本实用新型的目的是提供一种用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的免疫检测试剂盒，该用于检测抗人乳头瘤病毒抗体的免疫检测试剂盒可以高灵敏度、高特异性和高稳定性地检测血液或唾液中的HPV抗体，从而可以为医生准确诊断病人宫颈上皮内瘤变和子宫颈癌带来依据，进而及时采取治疗，以防止癌症发生，或癌症扩散，及时减轻病人痛苦，适于大规模推广应用。