[发明专利]使用HPLC法测定丁酸和丁酸钠的方法

说明书

技术领域

本发明涉及丁酸和丁酸钠的测定，具体来说尤其涉及一种使用高效液相色谱（HPLC）法测定丁酸和丁酸钠的方法。

背景技术

丁酸可以起到调节宿主的基因表达及预防和治疗肠炎等肠道疾病的作用，同时，丁酸也是一种重要的合成香料以及其他精细化工产品的原料；而丁酸钠的主要功能有：维护和调整胃肠道内微生态平衡；促进胃肠道细胞的增殖和成熟；为肠道上皮细胞直接提供能量来源；快速修复受损肠绒毛细胞；似母乳奶酪味诱食，显著提高采食量，可广泛用于畜禽饲料添加。

但是，丁酸钠对酸环境尤其敏感，在胃中立刻形成丁酸，导致丁酸钠无法被肠道吸收，为了解决上述问题，现有技术中将丁酸钠制造呈微囊形式，丁酸钠微囊在特定的pH值、酶等作用下，丁酸钠活性成分在动物体内缓释、控释或靶向释放，活性成分发挥最佳的效能。

然而在现有的专利或文献中，通常仅公开了丁酸化合物或丁酸化合物微囊化的制造方法，尚未发现对丁酸和丁酸钠的检测方法，无法实现丁酸和丁酸钠含量的测定。

发明内容

本发明的目的在于，提出一种使用高效液相色谱（HPLC）法测定丁酸和丁酸钠的方法，本发明的技术方案能够快速、准确地测定丁酸和丁酸钠，测定方法简单。

为实现上述目的，本发明提供的使用HPLC法测定丁酸和丁酸钠的方法，将精密吸取的标准品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，其中，使用C18色谱柱，流动相为乙腈加入0.1%的磷酸溶液，流动相中乙腈与磷酸溶液的体积比为20:80，所述乙腈为色谱纯，流速为1.0ml/min，检测器为紫外检测器，测定波长为206nm，柱温为30℃，进样量为20μL。

优选地，所述供试品溶液的制备步骤为：精密称定正丁酸0.1g或正丁酸钠0.125g，置于100ml容量瓶中，用0.1%的磷酸溶液稀释至100ml，摇匀后过0.45μm微孔滤膜，为供试品溶液。

优选地，所述供试品溶液的制备步骤为：精密称定包含正丁酸钠0.125g的丁酸钠微囊，置于100ml容量瓶中，加1%的磷酸溶液60ml，置水浴中加热溶解，然后移至超声波清洗器中，超声3min，取出放冷至室温，用1%的磷酸溶液稀释至100ml，摇匀后过0.45μm微孔滤膜，为供试品溶液。

优选地，所述丁酸钠微囊中丁酸钠的质量百分比为30%至70%。

优选地，所述丁酸钠微囊中丁酸钠的质量百分比为30%。

优选地，所述标准品溶液的制备步骤为：精密称定正丁酸标准品0.1g，置于100ml容量瓶中，用水稀释至100ml，摇匀后过0.45μm微孔滤膜，为标准品溶液。

优选地，所述磷酸为优级纯。

本发明提供的使用HPLC法测定丁酸和丁酸钠的方法，在检测饲料添加剂中的应用。

优选地，所述的饲料添加剂为丁酸钠和丁酸钠微囊。

由上述的方案可知，本发明所述使用HPLC法测定丁酸和丁酸钠的方法准确、操作简便、重复性好，也适用于在检测饲料添加剂中的应用，能精确测定饲料添加剂中丁酸钠的含量，从而保证饲料添加剂中的丁酸钠含量的准确性。

附图说明

图1为本发明中丁酸标准品溶液的色谱图；

图2为本发明中丁酸供试品溶液的色谱图；

图3为本发明中丁酸钠供试品溶液的色谱图；

图4为本发明中丁酸钠微囊供试品溶液的色谱图；

图5为为本发明中阴性丁酸钠微囊对照溶液的色谱图。

具体实施方式

使用仪器为UltiMate3000高效液相色谱仪，二元高压输液泵，UltiMate3000自动进样器，UltiMate3000紫外检测器，756PC紫外可见分光光度计，METTLER TOLEDOAG-135电子分析天平，KQ-250E超声波清洗器。