[发明专利]一种高叶绿素多蘖大麦的复合选育方法

权利要求书

1.一种生产高叶绿素含量和/或多茎蘖数的大麦的方法，所述方法包括：

（1）取大麦小孢子发育处于单核早期和/或中期的小穗，2-10℃处理10-30天；

（2）收获小孢子，培养小孢子，再生获得纯合加倍单倍体；

（3）水培所述纯合加倍单倍体；和

（4）筛选获得叶绿素含量高和/或茎蘖数多的大麦。

2.一种制备麦绿素产品的方法，所述方法包括：

（1）取大麦小孢子发育处于单核早期和/或中期的小穗，低温处理2-3周；

（2）收获小孢子，培养小孢子，再生获得纯合加倍单倍体；和

（3）水培所述纯合加倍单倍体，筛选获得叶绿素含量高和/或茎蘖数多的大麦；和

（4）将所述大麦制备成麦绿素产品。

3.一种提高大麦叶绿素含量和/或茎蘖数的方法，所述方法包括：

（1）取大麦小孢子发育处于单核早期和/或中期的小穗，2-10℃处理10-30天；

（2）收获小孢子，培养小孢子，再生获得纯合加倍单倍体；

（3）水培所述纯合加倍单倍体，获得再生植株；

其中，所述再生植株为叶绿素含量提高和/或茎蘖数增多的植株。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法在步骤（1）之前还包括：

（a）选取一批叶色浓绿、苗期生长旺盛、分蘖较多的大麦材料，水培后测定2叶1心期的叶绿素含量，至分蘖期后开始统计分蘖数、植株高度和/或茎基部周长，根据这些统计指标筛选出叶绿素含量高、分蘖数多、生长迅速的品种；和

（b）培养所述品种，获得步骤（1）所述的小孢子；和

（c）如果大麦材料只具有叶绿素含量高、分蘖数多、生长迅速中的一个目标性状，则在花粉成熟后进行相互授粉杂交，获得杂交F0代种子，繁育该F0代种子，获得F1代植株，从该F1代植株获得步骤（1）所述的小孢子。

5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）包括：

（2a）消毒所述穗子，然后清洗；

（2b）从所述穗子分离小孢子；

（2c）于室温、黑暗处理小孢子36-60小时；

（2d）用诱导培养基悬浮小孢子，并将悬浮液接种于诱导培养基中，诱导愈伤；和

（2e）将诱导所得愈伤组织转入分化培养基，培养获得再生苗，即所述纯合加倍单倍体。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤（2b）中，分离小孢子时，在试管中加入穗子和提取液，用高速分散器超速旋切，过滤，离心滤液，从而获得小孢子，其中，所述提取液含有含有4-8%甘露醇、1.0-1.5g/L的CaCl₂和0.8-1.2g/L的2-(N-吗啡啉)乙磺酸。

7.如权利要求5或6所述的方法，其特征在于，

诱导培养基以N₆培养基为基本培养基，其中加有6-糠氨基嘌呤0.3-0.8mg/L、2,4-二氯苯氧乙酸0.5-1.5mg/L、和麦芽糖70-120g/L；

分化培养基以MS为基本培养基，其中加有6-苄氨基腺嘌呤0.3-0.8mg/L、KT1.0-2.0mg/L、萘乙酸0.03-0.08mg/L和麦芽糖15-50g/L，用3-8g/L琼脂粉固化。

8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其特征在于，步骤（3）之后还包括：

将小孢子培养获得的再生植株放入大麦标准营养液中培养，进行再次筛选，选出叶绿素含量高和/或茎蘖数多的大麦，并收集其种子。

9.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述麦绿素产品选自：大麦纤维食品、大麦叶促康食品、麦草叶饮料、麦绿素可乐、青麦酶营养品，以及在大麦嫩叶汁粉中添加糊精、酵母、胡萝卜粉、高丽参粉的营养滋补品。

10.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所获得的小孢子用预处理液于室温、黑暗预处理36-60小时，其中，所述预处理液含有4-8%甘露醇、1.0-1.5g/L的CaCl₂和0.8-1.2g/L的2-(N-吗啡啉)乙磺酸。