[发明专利]从雨生红球藻中提取虾青素的方法

权利要求书

1.从雨生红球藻中提取虾青素的方法,其特征在于，将雨生红球藻种子原液进行扩大培养后，得雨生红球藻培养物，喷雾干燥得到所需要的藻粉，再将藻粉通过超声辅助混合试剂破壁处理，利用有机溶剂提取虾青素。 

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步骤： 

（1）用BBM培养基静置扩养至指数生长期，由日光灯提供侧光,12:12h照明,光强1000～1500lx,温度控制22～25℃，取样15mL～45ml购买的种子原液，置于2～5L的带有引流装置玻璃仪器培养，10～15d取出藻液进行后期虾青素积累培养； 

（2）将种子培养指数生长期的培养物,经离心后细胞团接种于BBM基本培养基培养10～15d，培养基置于通气式装置中，然后采用胁迫培养方法，用BBM做基本培养基,设置原初氮1/2～1/8的胁迫培养基，在营养胁迫试验中,光强提高到12000～15000lx,温度不变,用通气式搅拌培养； 

（3）精确地称取雨生红球藻粉，加入少量有机溶剂，置于超声细胞破碎仪下破壁，使虾青素从细胞内转到细胞外并溶于有机溶剂中，补足有机溶剂，置于恒温磁力搅拌装置中水浴回流提取，然后真空浓缩得虾青素的浓缩液。 

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的BBM培养基为：NaNo30.25g/L、K2HPO40.075g/L、MgSO4.7H2O0.075g/L、CaCl2.2H2O0.025g/L、K2H2PO40.075g/L、Nacl0.025g/L、B11mg/L、biotin0.25ug/l、B120.15ug/L.PIV1ml/L(FeCl3·6H2O97mg/L、MnCl2·4H2O41mg/L、ZnCl25mg/L、CoCl2·6H2O2mg/L、Na2MoO4·2H2O4mg/L、Na2EDTA750mg/L、蒸馏水1L),pH调至7～8。 

4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的胁迫培养基为：K2HPO40.075g/L、MgSO4.7H2O0.075g/L、CaCl2.2H2O0.025g/L、K2H2PO40.075g/L、Nacl0.025g/L、B11mg/L、biotin0.25ug/l、B120.15ug/L.PIV1ml/L(FeCl3·6H2O97mg/L、MnCl2·4H2O41mg/L、ZnCl25mg/L、CoCl2·6H2O2mg/L、Na2MoO4·2H2O4mg/L、Na2EDTA750mg/L、蒸馏水1L),pH调至7～8。 

5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述的的有机溶剂为丙酮、乙酸乙酯、无水乙醇、1：（1～2）的乙酸乙酯-无水乙醇(v/v)、氯仿、1：1的氯仿-无水乙醇(v/v)、二甲基亚砜中的一种。 

6.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，有机溶剂的体积与雨生红球藻的重量之比为：50～400:1，优选：100～200:1。 

7.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，超声强度为0～250W，优选100～200W。 

8.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，超声时间为10～60min，优选10～40min。 

9.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，提取温度为30～80℃，优选30～60℃。 

10.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，提取时间为30～120min，优选30～80min。