[发明专利]离子色谱法测定甲磺酸甲酯含量的方法及应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种测定甲磺酸甲酯的新方法，特别是离子色谱法测定甲磺酸甲酯含量的方法及应用。 

背景技术

甲磺酸甲酯(methylmethanesulfonate，MMS)是一种能够损伤DNA的烷化剂，主要使嘌呤碱基上的氮、氧原子发生甲基化，导致DNA双链断裂、点突变。所以甲磺酸甲酯是一种直接致突变物，具有致癌性，对甲磺酸甲酯准确的测定具有非常重要的意义，尤其是在药物中的含量。目前测定甲磺酸甲酯的方法主要有液相色谱-质谱法和气相色谱质谱法，但是这两种方法的操作都比较繁琐，尤其是气相色谱-质谱联用技术不仅操作繁琐，检测成本也很高。 

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明提供了离子色谱法测定甲磺酸甲酯含量的方法及应用。 

一种离子色谱法测定甲磺酸甲酯含量的方法，甲磺酸甲酯在碱性条件下加热水解生成甲磺酸和甲醇，以电导检测器为检测手段，经过阴离子交换柱分离后经过抑制器，然后通过检测甲磺酸的含量从而得到甲磺酸甲酯的含量。 

一种所述的方法测定齐多夫定中的甲磺酸甲酯含量，步骤如下： 

1)标准溶液的配制：称取甲磺酸0.1g置于10mL的容量瓶中，加入去离子水定容； 

2)淋洗液配制：6.3mmol／LNaHCO₃和1.7mmol／LNa₂CO₃的混合液； 

3)标准曲线制作：采用逐级稀释的方法配制不同浓度标准溶液色谱进样分析，得线性回归方程为Y＝8.71781X-1.77812，线性相关系数R＝0.9994； 

4)甲磺酸甲酯的前处理：称取甲磺酸甲酯0.1g置于10mL的容量瓶中，加入2mL甲醇待甲磺酸甲酯溶解后加入去离子水定容置刻度；甲磺酸甲酯的水解条件为：pH值为10、水解温度为80℃、水解时间为15min； 

5)测定：淋洗液由泵输送流经阴离子交换柱，所述的步骤4)中甲磺酸甲酯水解后的产物进入分离系统，在阴离子交换柱上被分离，流经抑制器，最后进入检测器检测后得色谱峰，对色谱峰面积处理后得实验数据； 

6)实际样品的测定：用所述的步骤4)中样品前处理的方法将齐多夫定水溶液配制好，进行 水解，水解液色谱进样；进样量：30μL，泵的流速为0.5mL／min。 

水解后的甲磺酸在0.5—10mg／L的范围内具有线性关系，线性相关系数为0.9994，检出限为0.10mg／L，加标回收率为92.06％-97.28％，相对标准偏差(RSD)0.80％。 

一种所述的方法的应用，应用于食品、环境、药代动力学分析领域的能够完全水解的酯类物质。 

本发明的有益效果： 

本发明首次利用离子色谱法对甲磺酸甲酯进行检测，甲磺酸甲酯在碱性条件下能够完全水解，将甲磺酸甲酯在最佳的水解条件(最佳的pH值、温度和水解时间)水解后，利用离子色谱仪对溶液进行分离检测；本方法所需仪器设备简单，成本低廉，避免了使用色谱-质谱联用技术，大大的简化了操作过程，降低了成本。本方法的整体稳定性，重现性理想，测定数据准确可靠，可以广泛应用于生物制药、药代动力学研究、食品安全等领域。目前国内外尚无关于离子色谱法测定甲磺酸甲酯的报道。 

附图说明

图1是甲磺酸标准品的离子色谱图(0.05mmol／L)； 

图2是甲磺酸甲酯随pH值变化的水解曲线图； 

图3是甲磺酸甲酯随水解时间变化的水解曲线图； 

图4是甲磺酸甲酯随温度变化的水解曲线图； 

图5是0.05mmol／L甲磺酸甲酯(在最佳水解条件下水解后)色谱图。 

具体实施方案

下面结合实施例对本发明做进一步具体说明。 

离子色谱法测定齐多夫定中甲磺酸甲酯的含量： 

具体步骤如下： 

1、标准溶液的配制：精确称取甲磺酸0.1g置于10mL的容量瓶中，加入去离子水定容至刻度；精确称取甲磺酸甲酯0.1g置于10mL的容量瓶中，加入适量甲醇待甲磺酸甲酯全部溶解后加入去离子水定容至刻度； 

2、标准曲线制作：采用逐级稀释的方法配制不同浓度标准溶液； 

3、样品前处理：精确称取齐多夫定10mg置于10mL的容量瓶中，加入去离子水溶解、定容至刻度，在温度80℃、pH值10、时间15min进行水解。