[发明专利]一种制备三尖衫宁碱的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种制备三尖衫宁碱的方法，属于医药工业领域。

背景技术

现有技术中制备紫杉醇，往往离不开紫杉醇与三尖衫宁碱的分离，采用现有技术分离紫杉醇与三尖衫宁碱，想得到高纯度的紫杉醇，必须牺牲紫杉醇收率才能保证三尖衫宁碱作为杂质不引入紫杉醇中，换句话说，要制备高纯度的三尖衫宁碱也同样牺牲三尖衫宁碱的收率。

发明内容

本发明通过等度反相分离得到了高纯度高收率的三尖衫宁碱，解决了上述问题。

本发明提供了一种制备三尖衫宁碱的方法，所述方法包括如下步骤：

①将原料溶解在溶剂中，所述原料与溶剂的质量体积比为10～30g/L，所述原料包括三尖衫宁碱、紫杉醇、7-表紫杉醇、10-去乙酰巴卡亭Ⅲ，所述溶剂为乙腈与去离子水，乙腈与去离子水的体积比为40：60～60：40；

②将溶解后原料泵入反相制备柱中，用步骤①中的溶剂洗脱6～10个柱体积，所述原料与反相填料的质量比为1：100～1000；

③将制备柱流出液按先后顺序每1/10～1个柱体积收集一次，共收集6～100个馏分；

④将步骤③中三尖衫宁碱含量≥90%的馏分合并、水浴30～35℃蒸发至固体析出、过滤、干燥、结晶、过滤、干燥。。

现有技术采用甲醇溶解原料，本发明采用乙腈-水，但本发明不易直接用乙腈-水溶解原料，需先用乙腈溶解原料后再补入水，采用乙腈-水溶解原料的优点为对反相分离没有极性不同的影响。

现有技术采用梯度洗脱分离原料，本发明采用等度洗脱分离原料，等度洗脱优点为在满足分离度的前提下使柱分离的操作简化，易于色谱柱的再生，易于流动相的回收再利用。

现有技术根据紫外检测器检测结果收集三尖衫宁碱，本发明采用制备柱流出液按先后顺序每1/10～1个柱体积收集一次的方式收集三尖衫宁碱，按柱体积收集能弥补紫外检测器在检测时看不到包在目标峰中杂质的缺陷，避免了因为紫外检测器缺陷造成的已分离开的杂质重新混入三尖衫宁碱中。

本发明所述步骤④从乙腈-水中蒸出三尖衫宁碱，不仅起到固液分离的作用还起到除去水溶性杂质的作用，省去了一步结晶工艺。

本发明所述步骤①中乙腈与去离子水的体积比优选为45：55～55：45。

本发明所述步骤②中反相填料优选为十八烷基键合硅胶。

本发明所述步骤②中原料与反相填料的质量比优选为1：200～1000。

本发明所述原料中优选为三尖衫宁碱含量为1～20%、紫杉醇含量为50～90%、7-表紫杉醇含量为1～20%、10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量为1～20%。

本发明所述原料来源于从含三尖衫宁碱的浸膏中经过树脂分离或正相色谱分离后得到的含三尖衫宁碱粗品。

本发明有益效果为：

①制备的三尖衫宁碱纯度高、收率高；

②反相层析操作条件简单；

③成本低适合工业化生产。

具体实施方式

下述非限制性实施例可以使本领域的普通技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。

实施例1

一种制备三尖衫宁碱的方法，所述方法包括如下步骤：

①将30g原料溶解在500ml乙腈中，溶解后加入500ml去离子水，所述原料包括11%的三尖衫宁碱、65%的紫杉醇、4%的7-表紫杉醇、3%的10-去乙酰巴卡亭Ⅲ。

②将溶解后原料泵入装有4kg反相填料的制备柱中，所述反相填料为十八烷基键合硅胶；用乙腈-水洗脱8个柱体积，所述乙腈与水的体积比为50：50。

③将制备柱流出液按先后顺序1/10个柱体积收集一次，共收集80个馏分；

④将步骤③收集的80个馏分TLC检测，检测后将含三尖衫宁碱的馏分HPLC检测，将三尖衫宁碱含量≥90%的馏分合并、水浴35℃减压蒸馏至固体析出、4℃放置12h后过滤、干燥、丙酮-石油醚结晶、过滤、干燥。

得到三尖衫宁碱含量为97.4%，收率为95.7%。

实施例2

一种制备三尖衫宁碱的方法，所述方法包括如下步骤：

①将15g原料溶解在225ml乙腈中，溶解后加入275ml去离子水，所述原料包括17%的三尖衫宁碱、55%的紫杉醇、4%的7-表紫杉醇、6%的10-去乙酰巴卡亭Ⅲ。

②将溶解后原料泵入装有4kg反相填料的制备柱中，所述反相填料为十八烷基键合硅胶；用乙腈-水洗脱8个柱体积，所述乙腈与水的体积比为45：55。

③将制备柱流出液按先后顺序1/10个柱体积收集一次，共收集80个馏分；