[发明专利]一种用于提高卷枝毛霉产γ-亚麻酸产量的发酵培养基及用途

说明书

【技术领域】

本发明属于微生物技术领域，更具体地，本发明涉及一种用于提高卷枝毛霉CBS108.16产γ-亚麻酸产量的发酵培养基，还涉及使用所述发酵培养基提高卷枝毛霉CBS108.16产γ-亚麻酸产量的方法。

【背景技术】

γ-亚麻酸(顺式-6,9,12-十八碳三烯酸)作为一种重要的不饱和脂肪酸，它是组成人体各组织生物膜的结构材料，也是合成前列腺素的前体。γ-亚麻酸在营养保健方面有重要的作用，它能够抗心血管疾病，降血脂，降血糖，抗癌以及美白和抗皮肤老化，其潜在的药用价值受到广泛的关注。

天然的γ-亚麻酸主要存在于琉璃苣、月见草和黑加仑中，其中油脂中γ-亚麻酸含量分别为22%、8%、16%。但是，植物种子采集困难，产量低，受气候地区的影响较大，且生产周期长，现已不能满足市场的需求。与这些传统的富含γ-亚麻酸的植物相比，微生物拥有生长速率快，培养条件简单，不依赖天气等优点。因此，用微生物来替代传统植物生产γ-亚麻酸具有广阔的前景。卷枝毛霉，作为富含γ-亚麻酸的一种微生物，其γ-亚麻酸含量约为15～18%，在上世纪已被作为生产γ-亚麻酸的模式菌株。

微生物培养基中的氮源是其生长必不可少的营养成分，也对一些活性物质的产量起着重要的重要，其中对微生物油脂积累的影响已被广泛研究。而氨基酸作为重要的氮源，能够直接参与蛋白质的合成，已有文献报道它们能调控酿酒酵母的基因表达水平，另外，氨基酸和它们的一些代谢产物也能调控其它代谢过程。

目前，对于添加氨基酸为氮源来提高γ-亚麻酸产量的研究在国内外并不多见。本发明以卷枝毛霉CBS108.16为出发菌株，以氨基酸为营养氮源提高其γ-亚麻酸产量。

【发明内容】

[要解决的技术问题]

本发明的目的是提供一种用于提高卷枝毛霉（Mucor circinelloides）CBS108.16产γ-亚麻酸产量的发酵培养基。

本发明的另一个目的是提供一种使用所述发酵培养基提高卷枝毛霉CBS108.16产γ-亚麻酸产量的方法。

[技术方案]

本发明是通过下述技术方案实现的。

本发明涉及一种用于提高卷枝毛霉CBS108.16产γ-亚麻酸产量的发酵培养基。

所述的发酵培养基含有一种或多种选自酪氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸的氨基酸氮源。

所述酪氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸的浓度以N元素计是0.3～3g/L。

根据本发明的一种优选实施方式，所述酪氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸的浓度以N元素计是0.5～2.6g/L。

根据本发明的另一种优选实施方式，除氨基酸外，它还含有其它的有机氮源，其它有机氮源的浓度以N元素计是0～0.2g/L。

根据本发明的另一种优选实施方式，其它的有机氮源是酵母粉、尿素或蛋白胨。

根据本发明的另一种优选实施方式，所述的发酵培养基组成如下：50～120g/L葡萄糖、以N元素计0.3～3.0g/L酪氨酸、天冬酰胺或天冬氨酸、5～10g/LKH₂PO₄、1～5g/LNa₂HPO₄、1～5g/LMgSO₄·7H₂O、0.01～2.0g/L酵母粉、尿素或蛋白胨、0.1g/LCaC1₂·2H₂O、0.008g/LFeCl₃·6H₂O、0.001g/LZnSO₄·7H₂O、0.0001g/LCuSO₄·5H₂O、0.0001g/LCo(NO₃)₂·6H₂O与0.0001g/LMnSO₄·5H₂O。

本发明涉及一种用于提高卷枝毛霉CBS108.16产γ-亚麻酸产量的方法。

该方法的步骤如下：

A、菌种活化

按照卷枝毛霉CBS108.16孢子液与活化培养基的体积比1:1000～2000，将卷枝毛霉CBS108.16孢子液接入装有活化培养基的带挡板三角瓶中，在摇床中在温度25～35℃与转速100～200rpm的条件下恒温培养16～30h，得到一种活化菌种液；

B、种子培养