[发明专利]一种白首乌中C21甾苷激活酪氨酸酶作用的用途

说明书

技术领域

本发明涉及一种白首乌中C₂₁甾苷对酪氨酸酶激活作用的用途。本发明涉及从中药白首乌中提取、分离得到的一种C₂₁甾苷对酪氨酸酶具有很强的激活作用，阐明了其制备方法及其在医药、日用化工领域的新用途。

背景技术

酪氨酸酶是一种含铜的多酚氧化酶，它是生物体黑素合成过程中的限速酶，催化酪氨酸羟化为多巴、多巴氧化为多巴醌以及5，6-二羟基吲哚(DHI)氧化为5，6-吲哚醌三个步骤。其表达和活性决定着黑色素生成的量和速度。反应过强可引起黑素过多症，如雀斑、黄褐斑等，黑色素生成过多是黄褐斑形成的根本原因；反应过弱或缺乏反应，则可引发白发、白癜风等。中老年人白发者毛囊的毛球中黑素细胞内酪氨酸酶活性逐渐丧失，合成黑素能力逐渐减弱乃至消失，所以毛发中色素消失而变白发；白癜风皮损处黑素细胞内黑素减少甚至消失，白癜风活动期黑素细胞密度降低。酪氨酸酶的活性决定着黑色素的合成及合成量的多少，促进其活性即可使黑色素生成增多，从而治疗色素缺失性疾病如白发、白癜风等。

白首乌来源于萝摩科鹅绒藤属3种植物【分别为耳叶牛皮消(Cynanchum auriculatum Royle ex Wight)、戟叶牛皮消(Cynanchum bungei Decne)和隔山消(Cynanchum wifordii Hemsl)】的块根，是临床常用的补益和抗衰老中药，自古以来就被视为摄生防老、益精养颜的珍品。现代研究发现白首乌中含有多种活性成分，如C₂₁甾苷、多糖、磷脂等。如公告号为101002836B的专利“白首乌总苷提取物在制药中的用途”发明了白首乌总苷提取物用于制备治疗或预防抑郁症的药物的用途；公告号为100429217的专利“白首乌皂苷化合物、总皂苷及其在治疗胃肠道疾病药物中的应用”发现白首乌碳-21甾体皂苷和白首乌总皂苷是有效治疗胃炎、胃和十二指肠溃疡、预防溃疡复发、改善胃肠道动力的药物；公告号为101029069B的专利“白首乌中新的化合物开德苷元3-O-β-磁麻糖苷及其用途”发现了该化合物的体外抗肿瘤作用及用途。另外，公告号为102068401B的专利“首乌黑发方及其制备方法”发明了以何首乌、黑芝麻为首的中药组合物通过提高激活头发毛囊中酪氨酸酶活性和促进黑色素合成达到乌黑头发，改善须发早白等目的，但其中的何首乌与白首乌在植物中属于不同的种属。目前尚无白首乌药材中提取的C₂₁甾苷具有增强酪氨酸酶活性相关用途的报道。

发明内容

本发明的目的在于：提供一种白首乌中C₂₁甾苷的新用途。本发明白首乌中的一种C₂₁甾苷有显著的酪氨酸酶激活作用，可用于制备治疗色素缺失性疾病(如白发、白癜风等)的药物，也可用于制备皮肤美黑、乌发的日化用品。

本发明通过以下技术方案实现：

所述白首乌C₂₁甾苷是这样制备的：白首乌粉加入95％乙醇加热回流3h，过滤得到醇提液，减压浓缩、室温挥干溶剂后得到醇提物。将此提取物溶于甲醇：水(体积比)为9：1的溶液中，用石油醚振摇脱脂3次，萃余液加适量的蒸馏水减压浓缩回收甲醇，以氯仿进行多次萃取。将氯仿萃取液合并，浓缩至小体积后滴加于5倍石油醚中，搅拌分散，析出沉淀物，过滤干燥得总甾苷。将总甾苷用少量氯仿溶解，通过硅胶柱层析，依次用氯仿(I)、氯仿：甲醇(体积比)为98：2(II)、95：5(III)、90：10(IV)，及甲醇(V)五个梯度进行洗脱。将洗脱液旋蒸，挥干洗脱剂，取适量总甾苷及各洗脱组分溶于溶剂(丙二醇：乙酸乙酯：磷酸盐缓冲液体积比为9：1：18)制得样品溶液，浓度为1mg/mL。