[发明专利]一种纳米基因导入材料及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及基因导入技术领域，特别是涉及一种纳米基因导入材料及其制备方法和用途。 

背景技术

随着人类基因图谱测定的完成，我们对人类疾病发病机制的认识在基因水平上取得了突破性的进展。目前研究表明，有许多疾病的发生及发展与基因密切相关。如果可以筛查出与疾病特异相关的基因片段或者基因突变，就可以有针对性地在基因水平上进行特异治疗，如通过导入相关缺失基因或沉默基因，以增强相关缺失功能或者沉默致病基因，从而达到彻底治疗的目的。将目的基因安全有效地导入生物体内是目前此研究领域中的关键和难点。 

基因导入系统或方法可以分为两类：一类是病毒型基因导入系统，以逆转录病毒、腺病毒、腺相关病毒为载体；另一类是非病毒型基因导入系统，其转染方式如显微注射、基因枪、磷酸钙共沉淀、阳离子脂质体法、以及新兴的纳米基因导入材料。其中，病毒型基因导入系统存在许多严重的不足，如病毒转染有可能激活原癌基因等，因此，非病毒型转染方式是目前的研究热点。 

上述非病毒基因导入系统的几种转染方式中，显微注射一次只能处理一个细胞；基因枪穿透力十分有限；磷酸钙共沉淀法结果不稳定，转染效率受温度、浓度、操作环境等众多因素影响；阳离子脂质体法虽然表现了良好的转染效率，但是过高的毒性又限制了它的应用。 

发明内容

本发明的目的之一在于避免现有技术中的不足之处而提供一种具有良好的生物相容性、稳定且转染效率高的纳米基因导入材料。 

本发明的目的之二在于避免现有技术中的不足之处而提供一种反应简单、容易操作、可重复性好的纳米基因导入材料的制备方法。 

本发明的目的之三在于避免现有技术中的不足之处而提供一种具有良好的生物相容性、稳定且转染效率高的纳米基因导入材料的新用途。 

本发明的目的通过以下技术方案实现： 

本发明的一种纳米基因导入材料，它是由C₁₈V²⁺和氯铂酸反应制成的平均粒径为100nm的PtNPs–C₁₈V²⁺复合物，其中C₁₈V²⁺和氯铂酸用量的摩尔比为3:1；。

C₁₈V²⁺和氯铂酸反应形成的PtNPs–C₁₈V²⁺复合物由于其表面铂离子的正电性，使其具备成为转染材料的潜力，C₁₈V²⁺可以控制生成的PtNPs–C₁₈V²⁺复合物为球形颗粒，通过对反应时间的控制可以控制PtNPs–C₁₈V²⁺复合物的平均粒径在100nm左右，从而符合转染要求。 

本发明的一种纳米基因导入材料的制备方法如下： 

1）用去离子水分别制备浓度为6mM的C₁₈V²⁺溶液和浓度为2mM的氯铂酸溶液；

2）取0.1ml所述C₁₈V²⁺溶液，加入5ml二甲基甲酰胺溶液，并加热至110°C，然后滴加0.1ml所述氯铂酸溶液，冷却回流20min后，将所获得的混合物在7000rpm转速下离心3min，过滤后所得的沉淀物用去离子水和乙醇冲洗，最终产物分散在乙醇中，最后用超声处理，超声频率为28kHz，处理时间3min。

本发明提供了一种纳米基因导入材料的新用途，所述PtNPs–C₁₈V²⁺复合物与绿色荧光蛋白质粒基因pGFP以非共价方式结合，形成无机纳米基因导入系统，用于基因转染。 

所述PtNPs–C₁₈V²⁺复合物作为基因转染材料在制备抗肿瘤药物中的应用。 

本发明的有益效果：