[发明专利]一种提高古龙酸发酵单位的方法

说明书

技术领域

本发明属于发酵医药技术领域，特别是涉及一种提高古龙酸发酵单位的方法。 

背景技术

维生素C，又名抗坏血酸，作为人体必需的一种维生素和抗氧化剂，广泛应用于制药、食品、化妆品和饲料等工业中。 

目前，维生素C主要是采用两步发酵法制备： 

第一步是以山梨醇为原材料，以黑醋菌为产生菌将山梨醇转化为山梨糖的过程，其主要工艺过程如图1所示。 

第二步是以第一步发酵所得的L－山梨糖为原料，一株氧化葡萄糖酸杆菌（“小菌”）和一株巨大芽孢杆菌（“大菌”），大小两种菌自然组合的混合菌株发酵生成2～酮基～L～古龙酸，再进行转化精制得到维生素C，主要工艺过程如图2所示。 

VC的产量主要决定于第二步发酵中古龙酸的发酵水平。第二步发酵中的小菌为革兰氏阴性菌，主要功能是将山梨糖转化为古龙酸；大菌为革兰氏阳性菌，作为伴生菌，其主要功能是通过其在形成芽孢的过程中释放出来的活性物质为小菌提供营养，促进小菌产生古龙酸。但在混菌发酵过程中，大菌、小菌的生长既相辅相成又相互制约。而提高古龙酸的发酵水平，必须建立在两种菌均可最优化培养的前提下才能实现。 

发明内容

本发明的目的就在于提供一种提高古龙酸发酵单位的方法，该方法是通过减少大小菌生长时期相互的制约作用，提高小菌产酸时期大菌促进小菌产酸的作用，并使这种促进作用实现有效可控。 

为此，本发明采用如下技术方案： 

一种提高古龙酸发酵单位的方法，其特征是：将维生素C二步发酵法中的第二步发酵过程中的大菌和小菌分开进行培养，然后将大菌发酵后的过滤液补入 到小菌的发酵培养过程中。 

所述大菌发酵至大菌空胞明显、pH稳定在8.5～10.0时停罐过滤得到过滤液。 

所述大菌培养过程为：首先将大菌接入大菌种子培养基中，在30℃～35℃、罐压0.04～0.08Mpa、空气流量：种子培养基体积=0.5:1～2.0:1条件下培养8～10h后移入发酵培养基中放大培养，控制发酵温度30℃～35℃、罐压0.04～0.08Mpa、空气流量：种子培养基体积=0.5:1～2.0:1条件下培养8～12h，至大菌空胞明显、pH稳定在8.5以上时停罐过滤。 

所述大菌种子培养基组成为：玉米浆0.2～2.0%，硫酸镁0.01～0.1%，磷酸二氢钾0.01～0.1%，碳酸钙0.02～0.2%。 

所述大菌发酵培养基组成为：玉米浆0.2～2.0%，硫酸镁0.01～0.1%，磷酸二氢钾0.02～0.2%，碳酸钙0.02～0.2%。 

所述小菌培养过程为首先将小菌接入小菌种子罐中，在27～35℃、罐压0.03～0.08Mpa、空气流量：发酵液体积=0.5:1～3.0:1下培养10～12h，至菌浓达5%时移入小菌发酵培养基中进行发酵培养，控制发酵温度27～35℃、罐压0.03～0.08Mpa、空气流量：发酵液体积=0.5:1～3.0:1，在培养5～7h时补入山梨糖、碱及大菌发酵过滤液，放罐周期为38～44h。 

所述大菌发酵过滤液补入量：山梨糖补入量=1/4～3/4，其中山梨糖的补入量发酵液体积的0.2～2%。 

所述小菌种子培养基组成为玉米浆0.2～2.0%，酵母膏0.01～0.1%，尿素0.03～0.3%，硫酸镁0.01～0.1%，碳酸钙0.01～0.1%。 

所述小菌种子培养基组成为玉米浆0.2～2.0%，酵母膏0.01～0.1%，尿素0.03～0.3%，硫酸镁0.01～0.1%，碳酸钙0.01～0.1%。 

菌株：巨大芽孢杆菌，俗称大菌；氧化葡萄糖酸杆菌，俗称小菌。 

本发明中大菌分开培养的培养基适合大菌快速生长并衰亡，小菌分开培养的培养基适合小菌快速生长增殖。