[发明专利]一种免疫细胞冻存液、其制备方法及应用有效
| 申请号： | 201310571326.5 | 申请日： | 2013-11-13 |
| 公开（公告）号： | CN104026118A | 公开（公告）日： | 2014-09-10 |
| 发明（设计）人： | 项春生;王大奎;张翠翠 | 申请（专利权）人： | 杭州易文赛生物技术有限公司 |
| 主分类号： | A01N1/02 | 分类号： | A01N1/02 |
| 代理公司： | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人： | 巩克栋 |
| 地址： | 311121 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 免疫 细胞 冻存液 制备 方法 应用 | ||
1.一种免疫细胞冻存液，其特征在于，所述免疫细胞冻存液包含二甲基亚砜、人供体血浆和免疫细胞基础培养基。
2.根据权利要求1所述的免疫细胞冻存液，其特征在于，所述免疫细胞冻存液按体积百分比包含5-10%二甲基亚砜、10-90%人供体血浆和0.01-80%免疫细胞基础培养基。
3.根据权利要求1或2所述的免疫细胞冻存液，其特征在于，所述免疫细胞冻存液按体积百分比由5-10%二甲基亚砜、10-90%人供体血浆和0.01-80%免疫细胞基础培养基组成。
4.根据权利要求1或2所述的免疫细胞冻存液，其特征在于，所述免疫细胞冻存液按体积百分比包含5-10%二甲基亚砜、10-40%人供体血浆和50-80%免疫细胞基础培养基。
5.根据权利要求1或2所述的免疫细胞冻存液，其特征在于，所述免疫细胞冻存液按体积百分比包含10%二甲基亚砜、10%人供体血浆和80%免疫细胞基础培养基。
6.根据权利要求1-5任一项所述的免疫细胞冻存液，其特征在于，所述免疫细胞基础培养基选自opTmizerTMCTSTMT-Cell Expansion SFM培养基或RPMI-1640培养基。
7.如权利要求1-6任一项所述的免疫细胞冻存液的制备方法，其特征在于，所述方法包括将所述二甲基亚砜、人供体血浆和免疫细胞基础培养基混合的步骤。
8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述方法包括：
（1）制备人供体血浆；
优选地，通过将抗凝外周血离心，吸取上层血浆，52-60℃、优选56℃水浴上层血浆25-35min、优选30min，然后离心弃沉淀的过程制备人供体血浆；和
（2）将所述二甲基亚砜、人供体血浆和免疫细胞基础培养基按配比混合，得到所述免疫细胞冻存液。
9.一种免疫细胞的冻存方法，其特征在于，包括：
（a）将免疫细胞悬浮于权利要求1-6任一项所述的免疫细胞冻存液；和
（b）进行程控降温至-80℃，然后转移至液氮中冷冻保存。
10.如权利要求1-6任一项所述的免疫细胞冻存液在冻存免疫细胞中的应用；
优选地，所述免疫细胞为外周血单个核细胞，更优选自然杀伤细胞。
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