[发明专利]一种纤维素酶的液态发酵生产方法有效
| 申请号： | 201310557902.0 | 申请日： | 2013-11-11 |
| 公开（公告）号： | CN103555694A | 公开（公告）日： | 2014-02-05 |
| 发明（设计）人： | 张东远;张粲;李晨;贾文娣;赫荣琳;武改红;陈树林 | 申请（专利权）人： | 中国科学院天津工业生物技术研究所 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12R1/80;C12R1/885 |
| 代理公司： | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人： | 史霞 |
| 地址： | 300308 天津市东*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 纤维素酶 液态 发酵 生产 方法 | ||
1.一种纤维素酶的液态发酵生产方法，其特征在于，包括一次发酵过程和二次发酵过程，
其中，所述一次发酵过程为：(1)向一次发酵培养基中加入纤维素酶产生菌A进行一次发酵，所述一次发酵培养基以纤维素为底物，当一次发酵液的滤纸酶活为10-20IU/ml时停止发酵，得到一次发酵液，(2)除去一次发酵液中的纤维素酶产生菌A的菌丝残片以及孢子，得到一次酶液；
所述二次发酵过程为：(1)分别向二次发酵的二次发酵培养基中加入一次酶液和纤维素酶产生菌B，从而构成发酵体系，其中，一次酶液的添加量为使所述发酵体系中滤纸酶活为0.03～1IU/ml，(2)在所述发酵体系中进行发酵，以生产纤维素酶。
2.如权利要求1所述的纤维素酶的液态发酵生产方法，其特征在于，所述纤维素酶产生菌A与所述纤维素酶产生菌B为同一种的菌种。
3.如权利要求1所述的纤维素酶的液态发酵生产方法，其特征在于，所述纤维素酶产生菌A与所述纤维素酶产生菌B为不同种的菌种。
4.如权利要求3所述的纤维素酶的液态发酵生产方法，其特征在于，所述纤维素酶产生菌A为桧状青霉，所述纤维素酶产生菌B为里氏木霉。
5.如权利要求2所述的纤维素酶的液态发酵生产方法，其特征在于，所述纤维素酶产生菌B为里氏木霉。
6.如权利要求4或5所述的纤维素酶的液态发酵生产方法，其特征在于，所述纤维素酶产生菌B为里氏木霉Rut C30。
7.如权利要求1所述纤维素酶的液态发酵生产方法，其特征在于，所述二次发酵过程中所述一次酶液的添加量为使所述发酵体系中滤纸酶活为0.5～0.7IU/ml。
8.如权利要求1所述的纤维素酶的液态发酵生产方法，其特征在于，所述一次发酵过程中的步骤(2)中，将一次发酵液在800～1200rpm下离心4～6min后，再用0.22～0.8μm的滤膜过滤，得到所述一次酶液。
9.如权利要求8所述纤维素酶的液态发酵生产方法，其特征在于，所述一次发酵过程中的步骤(2)中，将一次发酵液在800～1200rpm下离心4～6min后，再用0.45μm的滤膜过滤后，得到所述一次酶液。
10.如权利要求1所述的纤维素酶的液态发酵生产方法，其特征在于，所述一次发酵过程中的步骤(1)中，将经纤维素酶产生菌A培养获得的种子液与一次发酵培养基按照体积比为1∶20～1∶100进行接种，在22～28℃条件下发酵72～132h。
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