[发明专利]毛莲菜提取物在制备治疗白血病药物中的应用

权利要求书

1. 毛莲菜提取物在制备治疗白血病药物中的应用，所述毛莲菜提取物是按如下方法制备得到: 

（1）毛莲菜，用浓度30%-80%乙醇作为溶剂，在10℃-35℃温浸提取，提取次数为1-5次，每次提取时间为12-48小时，每次溶剂用量为毛莲菜重量的21-25倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥，得毛莲菜提取物A；

（2）将步骤（1）得到的提取物A加5-20倍量水溶解，滤过，得药液A和沉淀A；将沉淀A，采用高速逆流色谱法，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2：2：1：1)为溶剂系统，进行分离纯化，回收溶剂，浓缩干燥，得毛莲菜提取物B；

（3）将步骤（2）得到的药液A，通过聚酰胺柱柱，用水洗脱，再用浓度10%-70%的乙醇溶液进行梯度洗脱，收集不同浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，得毛莲菜提取物C；

（4）上述毛莲菜提取物B、毛莲菜提取物C，其中一种或两种按一定比例混匀，即得本发明的毛莲菜提取物。

2. 根据权利要求1所述毛莲菜提取物是按如下方法制备得到: 

（1）毛莲菜，用浓度30%-80%乙醇作为溶剂，在10℃-35℃温浸提取，提取次数为1-5次，每次提取时间为12-48小时，每次溶剂用量为毛莲菜重量的21-25倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥，得毛莲菜提取物A；

（2）将步骤（1）得到的提取物A加5-20倍量水溶解，滤过，得药液A和沉淀A；将沉淀A，采用高速逆流色谱法，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2：2：1：1)为溶剂系统，进行分离纯化，回收溶剂，浓缩干燥，得毛莲菜提取物B；

（3）将步骤（2）得到的药液A，通过聚酰胺柱柱，用水洗脱，再用浓度10%-70%的乙醇溶液进行梯度洗脱，收集不同浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，得毛莲菜提取物C；

（4）上述毛莲菜提取物B、毛莲菜提取物C混匀，即得本发明的毛莲菜提取物。

3. 根据权利要求1所述毛莲菜提取物是按如下方法制备得到: 

（1）毛莲菜，用浓度75%乙醇作为溶剂，在25℃温浸提取，提取次数为3次，每次提取时间为24小时，每次溶剂用量为毛莲菜重量的23倍；滤过，合并提取液，回收乙醇，浓缩，干燥，得毛莲菜提取物A；

（2）将步骤（1）得到的毛莲菜提取物A加15倍量水溶解，滤过，得药液A和沉淀A；将沉淀A，采用高速逆流色谱法，以石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2：2：1：1)为溶剂系统，进行分离纯化，回收溶剂，浓缩干燥，得毛莲菜提取物B；

（3）将步骤（2）得到的药液A，通过聚酰胺柱柱，用水洗脱，再用浓度60%的乙醇溶液进行梯度洗脱，收集60%浓度乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，得毛莲菜提取物C；

（4）将上述毛莲菜提取物B和毛莲菜提取物C混匀，即得本发明的毛莲菜提取物。

4. 根据权利要求1、权利要求2、权利要求3所述毛莲菜提取物，其特征在于：所述的毛莲菜提取物中，毛莲菜提取物B主要含有：中美菊素 C；9α-羟基-11β,13-二氢中美菊素 C 3-O-β-吡喃别苷（9α-Hydroxy-11β,13-dihydrozaluzanin C 3-O-β-allopyranoside）；10β,14 -Dihydroxy-10（14）,10β(13)-tetrahydro-8,9-didehydro-3-deoxyzaluzanin C 10-O-β-glucopyranoside；毛连菜苷A（picriside A)；毛连菜苷B（picriside B)；毛连菜苷C（picriside C)；山莴苣素（lactucin)；11β-13-二氢山莴苣素（11β-13-dihydrolactucin)。

5.  根据权利要求1、权利要求2、权利要求3所述毛莲菜提取物，其特征在于：所述的毛莲菜提取物中，毛莲菜提取物C主要含有：木犀草素（luteolin），木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷，金丝桃素（hypericin），金丝桃苷（hyperoside）。

6. 根据权利要求1所述应用为毛莲菜提取物在制备通过提高NCK、IL-2、IL-6、IFN-γ活性治疗白血病药物中的应用。

7. 根据权利要求1所述的毛莲菜提取物与化学药或中药或天然药物组成的治疗白血病药物。