[发明专利]一种启动子OsP004、制备方法及应用

权利要求书

1.一种启动子，其特征在于，所述启动子含有选自以下任意一组并具有启动子功能的核苷酸序列：

a、Seq ID No.1所示的核苷酸序列；

b、与Seq ID No.1互补的核苷酸序列；

c、在高等严紧条件下能够与上述a或b的核苷酸序列杂交的核苷酸序列；

d、对上述a或b所示核苷酸序列进行一个或多个碱基的取代、缺失、添加修饰的核苷酸序列；

e、与上述a或b所示核苷酸序列具有至少90％同一性的核苷酸序列。

2.一种核酸构建体，其特征在于，包含权利要求1所述的启动子，以及与启动子可操作连接的基因序列，所述启动子与所述基因序列来源相同或者不同。

3.一种载体，其特征在于，所述载体含有权利要求1所述的启动子或权利要求2所述的核酸构建体；优选地，所述载体为权利要求1所述的启动子或权利要求2所述的核酸构建体与pMD18-T或p8质粒经重组得到的重组载体。

4.一种重组细胞，其特征在于，所述重组细胞含有权利要求1所述的启动子或权利要求2所述的核酸构建体或权利要求3所述的载体；所述重组细胞为重组大肠杆菌细胞或重组农杆菌细胞。

5.一种含有权利要求1所述启动子、权利要求2所述核酸构建体、权利要求3所述载体、权利要求4所述重组细胞的植物愈伤组织、植物外植体或植物；所述植物为单子叶植物；优选地，所述植物为稻属；优选地，所述植物为水稻；优选地，所述植物为水稻日本晴。

6.一组引物对，所述引物对用于扩增得到权利要求1所述的启动子，其特征在于，所述引物对的两条引物分别含有Seq ID No：2和Seq ID No：3所示的序列；所述的两条引物在5’端分别连接有限制性酶切位点和/或保护碱基；优选地，所述引物对的两条引物分别具有Seq ID No：4和Seq ID No：5所示的序列；

7.一种制备权利要求1中所述Seq ID No.1启动子的方法，其特征在于，该方法包括，以水稻日本晴基因组DNA为模板，使用一对扩增引物进行扩增，所述扩增引物根据SEQ ID NO：1在在水稻日本晴gDNA中的序列分别针对首尾进行设计；优选地，所述扩增引物为权利要求6所述的引物对。

8.一种调控植物中基因表达的方法，其特征在于，该方法为，将权利要求1所述的启动子或权利要求2所述的核酸构建体或权利要求3所述的载体或权利要求4所述的重组细胞导入植物细胞；所述植物为植物愈伤组织；优选地，所述植物愈伤组织是通过具有权利要求1所述启动子或权利要求2所述核酸构建体或权利要求3所述载体的重组农杆菌转化的；优选地，所述植物为单子叶植物；优选地，所述植物为稻属；优选地，所述植物为水稻；优选地，所述植物为水稻日本晴。

9.一种制备转基因植物的方法，其特征在于，在有效产生植物的条件下培养上述的重组细胞或植物愈伤组织或植物外植体或植物；优选地，所述植物愈伤组织或植物外植体或植物含有权利要求1所述的启动子或权利要求2所述的核酸构建体或权利要求3所述的载体或权利要求4所述的重组细胞；优选地，所述植物为单子叶植物；优选地，所述植物为稻属；优选地，所述植物为水稻；优选地，所述植物为水稻日本晴。

10.根据权利要求1所述启动子或权利要求2所述核酸构建体或权利要求3所述载体或权利要求4所述重组细胞或权利要求5所述植物愈伤组织或植物外植体或植物在调控植物中目的基因表达或植物育种中的用途；优选地，所述植物为是单子叶植物；优选地，所述植物为稻属；优选地，所述植物为水稻；优选地，所述植物为水稻日本晴。