[发明专利]多氧霉素Polyoxin B组分高产菌株及其构建方法无效
申请号: | 201310502123.0 | 申请日: | 2013-10-23 |
公开(公告)号: | CN103525747A | 公开(公告)日: | 2014-01-22 |
发明(设计)人: | 陈文青;邓子新;程放;汪长春 | 申请(专利权)人: | 武汉大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/63;C12P21/02;C12R1/465 |
代理公司: | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人: | 薛玲 |
地址: | 430072 湖*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 霉素 polyoxin 组分 高产 菌株 及其 构建 方法 | ||
1.一种产多氧霉素的基因工程菌,其特征在于,该菌的polF基因发生突变,丧失功能。
2.根据权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,所述突变为polF基因同框缺失突变。
3.根据权利要求1所述的基因工程菌,其特征在于,所述基因工程菌的出发菌为金色产色链霉素(S. aureochromogenes)。
4.权利要求1~3所述产多氧霉素基因工程菌的构建方法,其包括如下步骤:通过构建带有报告基因的polF基因敲除载体,将该载体导入到目标菌株后筛选阳性菌株。
5.根据权利要求4所述的构建方法,其特征在于,所述基因敲除载体带有报告基因。
6.根据权利要求4或5所述的构建方法,其特征在于,所述基因敲除不改变polF基因的阅读框。
7.权利要求1~3任一项所述的基因工程菌在制备多氧霉素中的应用。
8.一种制备多氧霉素的方法,该方法是通过培养权利要求1~3任一项所述的基因工程菌,并从发酵液中分离得到多氧霉素。
9.一种用于制备权利要求1或2所述基因工程菌的载体,其特征在于,该载体包括polF基因上下游各2.5kb的基因片段和来自pJTU2180+的tsr基因。
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