[发明专利]构建和培育耐盐草坪草的方法无效
申请号: | 201310488229.X | 申请日: | 2013-10-17 |
公开(公告)号: | CN103540610A | 公开(公告)日: | 2014-01-29 |
发明(设计)人: | 麻冬梅;许兴;郭伶娜;蔡进军;杨亚亚 | 申请(专利权)人: | 宁夏大学 |
主分类号: | C12N15/84 | 分类号: | C12N15/84;A01H5/00 |
代理公司: | 北京世誉鑫诚专利代理事务所(普通合伙) 11368 | 代理人: | 郭官厚 |
地址: | 750021 宁夏回族*** | 国省代码: | 宁夏;64 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 构建 培育 草坪 方法 | ||
1.构建和培育耐盐草坪草的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(一)、构建农杆菌重组二元质粒:将拟南芥SOS1,SOS2,SOS3,CBL10完整的表达基因克隆,并将其植入大肠杆菌二元质粒,获得重组二元质粒;
(二)、转化农杆菌和草坪草:将重组二元质粒导入农杆菌,并感染草坪草愈伤组织;
(三)、选择和培育转基因草坪草。
2.根据权利要求1所述的构建和培育耐盐草坪草的方法,其特征在于,在步骤(一)中,选择KEGT-A作为重组二元质粒基本框架,在KEGT-A插入选择基因BAR基因。
3.根据权利要求2所述的构建和培育耐盐草坪草的方法,其特征在于,重组二元质粒的结构为:
RB基因-TM220基因-SOS1基因-SOS3基因-SOS2基因-TM1基因-CBL10基因-TM2基因-BAR基因-TM220基因-LB基因。
4.根据权利要求1所述的构建和培育耐盐草坪草的方法,其特征在于,在步骤(二)中,所述的草坪草愈伤组织由草坪草种子在MS+5.5ml/L2,4-D培养基中转化而来。
5.根据权利要求1所述的构建和培育耐盐草坪草的方法,其特征在于,在步骤(三)中,所述的转基因草坪草在MS+2.0ml/L6-BA+1.0ml/L KT培养基中分化出幼芽。
6.根据权利要求5所述的构建和培育耐盐草坪草的方法,其特征在于,在步骤(三)中,所述的转基因草坪草在1/2MS+0.3ml/L IBA培养基中分化出根,所述MS培养基的铁盐加倍。
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