[发明专利]一种牡丹雄蕊多糖的提取分离工艺

权利要求书

1.一种牡丹雄蕊多糖的提取分离工艺，其特征在于包括以下步骤：

1) 粉碎：采集牡丹雄蕊，干燥粉碎，过筛；

2) 细胞破壁：向粉碎的牡丹雄蕊中加水，搅拌均匀，置于超低温冰箱中冷冻；迅速投入水浴锅中水浴加热解冻；然后200W超声处理，过滤得固形物；

3) 脱脂、除寡糖：破壁后的牡丹雄蕊中加入石油醚回流浸提脱脂，过滤得固形物；向固形物中加入80％乙醇，回流，抽滤，以脱除寡糖；重复1～3次，抽滤得固形物，真空干燥；

4) 多糖的提取：向固形物中加入蒸馏水，加热，浸提，抽滤除去残渣得上清液；重复提取1～5次，上清液合并；

5) sevage法除蛋白：向上清液中加入sevage试剂(氯仿：正丁醇＝5:1, V/V)，搅拌，完成后5000 r/min 离心10分钟，取上层水溶液清液；

6) 透析脱盐及其它小分子化合物：将脱蛋白的多糖溶液移入透析袋中，保留至少1/3透析袋体系的空间；在在同等体积的蒸馏水中透析24h，每8h换一次水，以脱盐及除去其它小分子化合物；水溶液减压浓缩得浓缩液；

7) 多糖沉淀和干燥：向浓缩液中加入95%的乙醇，置于0～4℃过夜，4800 r/min，离心10分钟，收集沉淀；收集的沉淀经真空冷冻干燥，即得牡丹花雄蕊多糖。

2.根据权利1所述的步骤1）中，其特征在于：牡丹花雄蕊阴干后粉碎至粒径为20～100目。

3.根据权利1所述的步骤2）中，其特征在于：加水的量为5～15倍量；超低温冰箱的温度为-60～-80℃，冷冻时间为12～16小时；水浴锅温度为70～90℃，水浴时间为1～2小时；超声处理时间为10～50分钟。

4.根据权利1所述的步骤3）中，其特征在于：破壁后的牡丹花雄蕊中加入石油醚，料液比为1:2～4(W/V)，回流时间为6～8小时；向固形物中加入80％乙醇，料液比为1:2～4(W/V)。

5.根据权利1所述的步骤4）中，其特征在于：向固形物中加入蒸馏水，料液比为1:10～30(W/V), 加热温度为60～90℃，提取时间为1～5小时。

6.根据权利1所述的步骤5）中，其特征在于：sevage试剂(氯仿：正丁醇＝5:1, V/V)的用量为浓缩液体积的0.1～0.3倍，搅拌时间为20～40分钟；重复操作3～5次。

7.根据权利1所述的步骤7）中，其特征在于：向浓缩液中加入3～5倍体积95%的乙醇。

8.根据权利1所述的方法，其特征在于：所述牡丹品种为凤丹，但不限于凤丹。