[发明专利]口服用重组人血清白蛋白融合蛋白制剂配方、产品及用途

说明书

本发明提供了具通用性、简单、显著有效的含有由一种或由多种具生物功能的重组人血清白蛋白融合蛋白加之适量的赋形剂、黏附剂、营养剂、缓冲盐组合而成的口服制剂；这种口服制剂的制备工艺、配方组成和生产工艺简单、具独特性、高质量和易于产业化。由口服制剂进而制备的各种可用于喷剂经口腔直接吸收、片剂经舌下直接吸收或经肠溶后直接吸收的不同形式产品，直接用于人类保健、身体机能改善为目的或成为具有疾病临床治疗意义的口服药物。

技术领域

本发明是中国发明专利ZL200910210379.8的继续申请，也是中国发明专利ZL021428816、ZL2004100428148、ZL200710057571.9和ZL200710059770.3的继续申请。本发明涉及重组人血清白蛋白融合蛋白口服制剂的配方组成及制备方法，并涉及单一融合蛋白或不同融合蛋白在制剂配方中的组合使用的方法。特别涉及由人血清白蛋白与人细胞生长因子所形成的重组融合蛋白的口服制剂配方、制备产品及在保健和医学上的应用。

技术背景

人血清白蛋白(HSA)是一种可溶性单体蛋白质，构成血液中蛋白总量的一半。白蛋白作为一种基本载体，携带传递脂肪酸、类固醇和激素分子等，其稳定的惰性性质是维持血压的一个重要因素。血清白蛋白是一种球状非糖基化的、分子量为65千道尔顿、具有585个氨基酸的血清蛋白质。这一蛋白(白蛋白前体)再通过高尔基体的转化加工，去除引导多肽，而分泌到细胞外。血清白蛋白有35个半胱氨酸，在血液中，白蛋白是一个有17个二硫键的单体(参见Brown JR，“白蛋白的结构、功能和应用”Pergamum，纽约，1977)。当没有分泌多肽时，在酵母细胞内的白蛋白产物是错配状态，将失去90％的抗原性(与血浆中自然状态白蛋白相比)，并且形成不溶性的白蛋白聚合体，不具有白蛋白的生物活性。现在用于临床的人血清白蛋白均是从人血浆中提取的。利用微生物重组表达白蛋白(rHSA)的生产已在专利EP330451、EP361991和于在林、富岩的中国授权发明专利ZL200410057313.7《高效表达人血清白蛋白酵母菌株的构建及发酵纯化工艺》中公开。

白蛋白是血液中的主要成分，在人体内含量为每升血液含40克，其半衰期寿命为14-20天。综上所述，治疗性蛋白质与白蛋白形成融合蛋白后，融合蛋白将具有极大的优势使之可抵御生物体内酶解作用，并可使治疗性蛋白质在体内、体外的寿命大大提高，达到药物长效化，同时还可以较高剂量使用。在药物制剂组成中，白蛋白也常被用作药物的稳定剂，尤其是生物药。利用基因工程技术，将人血清白蛋白与治疗性蛋白质基因融合在酵母菌中表达为融合蛋白，可增加治疗性蛋白质在血清中和储存时的稳定性，和较长的半衰期，达到蛋白药物的长效化。该项蛋白修饰药物长效化公共技术平台，在于在林、富岩中国授权发明专利ZL02142881.6、ZL200410042814.8和ZL200710057571.9中已公开，在此作为依据和引作参考文献。

治疗性蛋白质和重组人血清白蛋白融合蛋白均是在临床上以注射方式给药。于在林、富岩等在中国发明专利ZL200910210379.8《通用的注射用重组人血清白蛋白融合蛋白制剂配方》中公开了通用的重组人血清白蛋白融合蛋白注射用制剂配方及制备工艺和医学应用。本发明则继续公开了一种重组人血清白蛋白融合蛋白的口服制剂配方、制备方法，产品及医学应用。

人血清白蛋白融合蛋白是指人血清白蛋白的成熟肽完整氨基酸序列与治疗性蛋白质成熟肽完整氨基酸序列以不同方式链接，形成的全新氨基酸肽链。融合蛋白中的两个蛋白质分子之间可设有或不设有连接肽。治疗性蛋白质成熟肽可以其C-端与人血清白蛋白成熟肽氨基酸序列的N-端链接，或是治疗性蛋白质成熟肽氨基酸序列的N-端与人血清白蛋白氨基酸序列的C-端链接而成。治疗性蛋白质可以是任何具有生物学功能的蛋白质。重组人血清白蛋白融合蛋白是指人血清白蛋白融合蛋白利用基因工程技术在外源表达系统中经酵母菌、脊椎动物细胞(例如CHO)、细菌、真菌、动物、昆虫、植物等基因表达，经规模化分离纯化和制备而成的。重组人血清白蛋白融合蛋白包括，但不局限于，所有血细胞刺激生成因子、人生长激素、胰岛素、人胰高血糖素、人促胰岛素分泌肽、白介素、干扰素、皮肤细胞生长因子、