[发明专利]血清乙醇含量测定试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于血清检测试剂技术领域，尤其与一种用于血清中乙醇含量测定的试剂盒有关。 

背景技术

血清乙醇的定量测定对诊断和鉴别诊断急患疾病，抢救乙醇中毒十分重要，对处理交通肇事和法医鉴定是重要的科学依据，所以目前临床实验室普遍开展对血清乙醇含量的测定工作。乙醇含量的测定方法较多，有物理方法如气象色谱法、密度瓶法等等，化学方法如重铬酸钾比色法、乙醇氧化酶法等等，各种方法各有利弊。 

发明内容

本发明目的就是要适应临床实验室对血清乙醇含量测定的需要，提供一种用于血清乙醇含量的测定试剂盒。 

为此，本发明采用以下技术方案：血清乙醇含量测定试剂盒，包括配合使用的R1和R2两种独立液态试剂，其特征是：所述的R1试剂各成分浓度为：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）18～22g/L，其余为纯化水；所述的R2试剂各成分浓度为：己二酸二酰肼（ADH）35.5～41.5mg/L，Tris-HCL缓冲液11.9～12.3g/L，其余为纯化水。 

优选的，所述的R1试剂各成分浓度为：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）20g/L，其余为纯化水；所述的R2试剂各成分浓度为：己二酸二酰肼（ADH）38.5mg/L，Tris-HCL缓冲液12.1g/L，其余为纯化水。 

本发明是使用乳酸氧化酶法测定血清乙醇含量，根据“乙醇+NAD   乙醛+NADH”这个反应原理，在波长340nm处测定NADH每分钟吸光度的变化率，计算其含量。测定时，选用两根试管分别作为标准管和样品管，标准管中加入20微升已知乙醇浓度的校准液，样品管中加入20微升待测标本，然后在标准管和样品管中各加入本发明所述的R1试剂200微升混匀，在温度37℃下孵育5分钟后，再在标准管和样品管中各加入本发明所述的R2试剂50微升混匀，在温度37℃下延迟半分钟，使用全自动生化分析仪在主波长340nm时测定各管的吸光度A，血清乙醇含量（ALC浓度）就可以通过下述公式计算而得：ALC浓度（nmol/L）=(样品管吸光度Au/标准管吸光度)×校准液乙醇溶度。 

使用本发明可以达到以下有益效果：能够使用全自动生化分析仪直接测定血清乙醇含量，适合临床实验室对乙醇含量测定的需要。 

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进行进行详细描述。 

实施例一： 

本发明试剂盒包括配合使用的R1和R2两种独立液态试剂， R1试剂各成分浓度为：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）18g/L，其余为纯化水；R2试剂各成分浓度为：己二酸二酰肼（ADH）35.5mg/L，Tris-HCL缓冲液11.9g/L，其余为纯化水。

使用罗氏P800全自动生化分析仪，测定方法采用速率法，主波长采用340nm，辅助波长405 nm，定标模式采用线性，反应方向正向上升，选用两根试管分别作为标准管和样品管，标准管中加入20微升校准液，样品管中加入20微升待测标本，然后在标准管和样品管中各加入R1试剂200微升混匀，在温度37℃下孵育5分钟，然后再在标准管和样品管中各加入本发明所述的R2试剂50微升混匀，在温度37℃下延迟半分钟，在罗氏P800全自动生化分析仪测定各管的吸光度A，通过下述公式自动计算出血清乙醇含量：血清乙醇含量（ALC浓度）就可以通过下述公式计算而得：ALC浓度（nmol/L）=(样品管吸光度Au/标准管吸光度)×校准液乙醇溶度。 

实施例二： 

本发明试剂盒包括配合使用的R1和R2两种独立液态试剂， R1试剂各成分浓度为：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）20g/L，其余为纯化水；R2试剂各成分浓度为：己二酸二酰肼（ADH）38.5mg/L，Tris-HCL缓冲液12.1g/L，其余为纯化水。

使用罗氏P800全自动生化分析仪，测定方法采用速率法，主波长采用340nm，辅助波长405 nm，定标模式采用线性，反应方向正向上升，选用两根试管分别作为标准管和样品管，标准管中加入20微升校准液，样品管中加入20微升待测标本，然后在标准管和样品管中各加入R1试剂200微升混匀，在温度37℃下孵育5分钟，然后再在标准管和样品管中各加入本发明所述的R2试剂50微升混匀，在温度37℃下延迟半分钟，在罗氏P800全自动生化分析仪测定各管的吸光度A，通过下述公式自动计算出血清乙醇含量：血清乙醇含量（ALC浓度）就可以通过下述公式计算而得：ALC浓度（nmol/L）=(样品管吸光度Au/标准管吸光度)×校准液乙醇溶度。 

实施例三：