[发明专利]一种包裹阿霉素的聚乙烯亚胺-聚乙二醇-肌酸共聚物胶束及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种新型的抗癌药物的载体，特别涉及一种包裹阿霉素的聚乙烯亚胺-聚乙二醇-肌酸共聚物胶束及其制备方法。

背景技术

肌酸（creatine）学名为N-甲基胍乙酸，由精氨酸、甘氨酸及甲硫氨酸在体内合成，为肌肉等组织中贮存高能磷酸键的物质。而且肌酸是自然界中存在于人体内的一种氨基酸衍生物。由于肌酸不是激素，对人体的内分泌系统不会造成干扰和破坏，不会使人产生赖药性或生理性副反应，所以近些年来肌酸大受欢迎。

但是由于肌酸的水溶性和渗透性都很低，不利于直接服用，所以对它进行修饰，使其转化成更利于吸收的物质。于是通过将肌酸和聚乙二醇通过酰化反应连接在一起。

聚乙二醇（PEG）安全、无毒,具有油水二亲性且具有良好的生物相容性的高分子化合物，是经 FDA 批准的极少数能作为体内注射药用的合成聚合物之一。PEG与肌酸相连后,在机体内的渗透性大大的提高，有利于提高肌酸在胃与肠等消化系统的吸收，从而增强肌酸的生物活性，能够够增大肌酸的水溶性。

聚乙烯亚胺（polyethylenimine，PEI），PEI是目前应用较有效的聚阳离子型基因载体，它富含氨基可以与DNA链上负电性的磷酸根通过静电作用缔合成复合物，但由于PEI强的渗透作用，又表现出一定的细胞毒性。采用阳离子聚合物与非离子聚乙二醇的共聚物PEG-PEI作为载体，PEG在复合物的纳米粒子表面形成中性的水溶性壳层避免粒子在血液中聚集，减少粒子在传输过程溶解性差、细胞毒性大和传递过程中沉积等不足，大大减少血液循环中血浆蛋白的调理作用和网状内皮系统（REs）的吞噬，延长基因在血液循环中的半衰期。

抗癌药物阿霉素（Doxoeubicin，DOX），DOX为葸环类抗肿瘤抗生素，因其抗瘤谱广，对乏氧细胞有效，又为放射增敏剂，其在肿瘤治疗中占有重要地位。但是DOX的毒性比较大，除了骨髓抑制、肠道的毒副作用外，长期使用的话可能引起药物依赖的不可逆的心肌病变，引起严重的心脏毒性和肝脏损害。

中国专利 201210290731.5公开了一种聚乙烯亚胺-聚赖氨酸共聚物及其制备方法；中国专利 201010188716.0公开了聚乙烯亚胺-壳聚糖-硬脂酸嫁接物及制备与应用；张璇等[ 张璇,潘仕荣,吕澍.聚乙二醇-聚乙烯亚胺共聚物的制备及其表征中山大学学报(自然科学版)2006(06) ]研究了聚乙二醇-聚乙烯亚胺共聚物的制备和表征；邹芬等[邹芬,潘一峰,张红.聚乙二醇-聚乙烯亚胺/四氧化三铁纳米磁流体的毒性及其生物相容性， 中国组织工程研究与临床康复.2010(3)] 评价了聚乙二醇-聚乙烯亚胺/四氧化三铁纳米磁流体的毒性和生物相容性。可见聚乙二醇-聚乙烯亚胺共聚物是很好的嵌段共聚物载体。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具有载药量高、减少毒副作用、具备体内长循环的具有缓释药物的药物载体，通过物理化学方法将药物包埋进载体中，提供了该化合物胶束的制备方法。

两组分形成的嵌段共聚物聚乙二醇-聚乙烯亚胺（PEG-PEI）具有亲水性和疏水性，将疏水性抗癌药物裹在聚乙二醇-聚乙烯亚胺嵌段共聚物的疏水端（PEI）中，在亲水端聚乙二醇端连接上肌酸，可减少阿霉素对心肌的损坏作用。其中，PEG通过连接羧基后，再通过羧基端与PEI通过N端氨基的酰化修饰形成PEI-PEG。PEG与肌酸的连接是通过PEG与氨基连接后，再与肌酸通过N端氨基的酰化修饰形成聚乙二醇-肌酸（PEG-Cr）。

本发明的技术方案为：

包裹阿霉素的聚乙烯亚胺-聚乙二醇-肌酸共聚物的制备方法，包括以下步骤： 

（1）双羧基聚乙二醇（COOH-PEG-COOH）共聚物的合成：

将聚乙二醇-4000和丁二酸酐混合，加入吡啶作为催化剂，通入氮气作保护气体，在回流装置中反应，得到浅黄色的COOH-PEG-COOH，备用；

（2）氨基-聚乙二醇-羧基（NH₂-PEG-COOH）共聚物的合成：

称取步骤（1）制得的COOH-PEG-COOH溶于四氢呋喃（THF）中，移至两口瓶中，冰浴搅拌15~30min后，取乙二胺溶于30~50mL的四氢呋喃（THF）中，然后逐滴的加入到两口瓶中，冰浴搅拌1~4h，将得到的溶液放到真空干燥箱中干燥，得到NH₂-PEG-COOH的油状固体；

（3）肌酸-聚乙二醇-羧基（Cr-PEG-COOH）共聚物的合成：